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- 细工生物
- ecak-5
- 自产
- 2026年01月30日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Complete set of cryopreservation and recovery reagents
- 供应商：
细工生物
冻存复苏全套试剂(基于传统方案）：
dmso(干细胞验证） 100ml 价格800
胎牛血清（种子库级别） 100ml 价格1600
培养基（种子库级别） 500ml 价格 120
胰酶（种子库级别） 100ml 价格 120
专用冻存盒： 500
20240618
种子库更新优化，单克隆建议细工POTOCOL,适合杂交瘤融合后单克隆、原代建系、工程株、稳转株、耐药株、重要实验克隆株筛选、成瘤不稳定株克隆筛选、准株筛选（老手适合）
以下问题困扰实验并不顺利，配合我司胰酶配套。
成团成片，转染效率不高（悬浮免疫，原代请注明）堆叠式生长（类似类器官），原代首代传代后消化不下来（该问题简单解决是，在培养瓶用前铺层血清）高级解决来信告知详情，给出参考建议。
为更优质精准服务用户，所用试剂耗材，厂家，货号，操作步骤，预期要求告知。
可用复苏活率不高细胞验证，原代，细胞系都可以，告知细胞名称，生长特性，以前冻存方法，活率多少（是否含血清），目的要求，目前原代PBMC案例活率90%,三年统计数据，案例很稳定。智能客服
有订购实际权限老师，可发小规格试用，通过问题验证比较准确，冷冻保存环境变化较大，长期验证才是更优方案，上述细节沟通详细，顺利决绝问题后，再订购
20240629
对冻存挑剔细胞THP-1（免疫类）、胰岛胰腺类（原代，系）上皮类、原代、原代血液类
更挑剔细胞：耐药株，稳转株，国内建系，生产用种子库、各类原代。
后面碰到无解无文献支撑等难点痛点都可以讨论。（细工为国内建系，超量培养，维持培养做些技术储备目的）
讨论上述对细胞冻存细胞平时验证推荐，讨论理由，就是冻存前消化成单个，胰酶敏感重要性，这个我们总结有，巨噬系，原代，免疫系，肝类、原代，胰岛胰腺，上皮，腺类，腺类神经类共存系，淋巴类SV40,hTERT
THP-1,正常细胞系。生长特性：成团成片，堆叠生长。（试剂耗材种子库理念一致，要找到复苏活率稳平，多年长时间验证）
这步解决好了，在用经典冻存（经典一定要自己预实验为准），建议做到理想效率是，不管是那种细胞（，活率都在80%以上
细工方案要点提示：①冻存前胰酶处理（细工胰酶经过胰酶敏感细胞测试，提高活率关键步骤，这部验证成功，还可用到转染前细胞质量提升，大大增加转然后成功率，其他救助办法这里不展开，有需要可来信讨论）。②高质量血清，这部分验证成功，后面种子库试剂，正规库来源细胞救助，试验后死细胞过多，细工是通过免疫细胞，巨噬分化比较了不少厂家。实验涉及到分化影响可发试用比较。③促贴壁：特别是上皮类，这类包括很多难养系大部分是上皮类、腺与神经、免疫类特点都包含得系，特点是容易成球，成球速度比贴壁速度要快，我们持续统计这类问题解决目的是建系，和规模培养为后续超量培养，维持培养做些技术储备。目前有些小进展，涉及方法太多，这类先不阐述，有兴趣用户可来信讨论。
您建系，我全程陪同，总觉得冻存复苏这个很重要。
20240703
20240703
国内建系优化驯化细工优势：从几类难养特点，通过精筛，粗筛多种简单易行方法，难点提前讨论沟通，细工实践案例资料铺垫，继续问题统计与适合国内体系培养体系与建系特点，给些参考建议，各地有实验室条件实验室，理念一致，共享技术部份。
20240901
种子库-细工整套冻存复苏试剂备份组
冻存方法推荐：DMSO10%+FBS90%
对冻存复苏要求更高，可用案例细胞用细工推荐程序降温盒+棉花冻存细胞，国内建系推荐有一备份组按上述方法。
细胞培养最终目的-平稳的细胞状态，
常用的细胞三年做冻存复苏验证
难养细胞1-1.5年做冻存复苏验证
增强贴壁试剂辅助复苏验证优势：活率及状态都有明显提升，三年以上冻存复苏可做比较验证，活率及细胞舒展通过几天复苏后就可得到明显差别（救助案例多），该点优势在复苏上能有明显效果，后面有条件实验室，在平时培养中也是同理提高细胞增殖及状态，转染后传代死细胞多一种技术储备，也可用同理方法做比较。
注：
1：成片成团冻存前要解决，参考我司优化胰酶特点。
2：高质量血清在冻存复苏中非常关键，也建议有条件组，把平时采购血清前验证作为一个关键指标，其他细胞验证血清都可讨论。
20240929
北京地区，有种子库级别要求实验室，我司全套材料案例备份验证，细胞等水试剂全部提供一起验证，进口耗材要求，293，293T 建库细工备份方案，延展高滴度病毒生产，原代建系，晶体相关研究，二倍体生产直接到中式，都可讨论并一起合作建库，如验证顺利，国内库来源细胞陆续补充，有重点研究方向组，列出组织类别研究方向，海归老师，可全方位了解国内培养体系特点，细工大部分常规问题解决思路与配套试剂，痛点难点小成绩突破（学习海外实验室好习惯为主）。需要我们potocol的，邮件标明。
20240930
各地重点室长期合作目的
细胞全部来自国内正规库，案例细胞为国产备份水试剂体系做好充足冗余条件，长期验证，也与用户讨论新型试剂化学成分对细胞相关产品开发，该理念技术对接二倍体生产到中式无BUG,自动化培养转染冗余试剂也是我司开发重点（冗余水试剂及工艺）目前这套已在工业生产上有应用，也为工厂提前做些人才储备。有的设备比较贵重，实验室单独上可行性不高，我们可协作去工厂完成中式级别实验。
例如后面自动化转染，痛点就在精准细胞SOP培养控制，软件硬件结合。冗余试剂开发理念凸显，我司增强贴壁试剂工业应用第二年就开始开发这类需求试剂，当时目的是给操作人员更多容错空间试剂深度优化，了解产品，并深入理解，难点痛点问题反复验证。后面我们会列出冻存复苏案例相关前言技术，并与合作实验室一起统计开发，开发思路来源，就是冻存复苏各种挑剔细胞中问题。并长期验证，列出这个需求有些内容不能详尽告知，看下相关产品后两年大事件。
20241012
免疫细胞建系参考
1：建系目的，含血清方案（重复容易,成本低）结合简易单克隆法，克隆单细胞确保目的细胞，主单克隆群体增殖无影响（分出细胞在做鉴定）
2：避免外力（机械力，化学力）影响建系，国外样本库自动化研究已有案例介绍）
3：聚丙烯管进行进行细胞处理和分选，15%FBS+1640
4：可讨论最佳温度（4°C或15°C或室温）
5：低俗离心（国外样本库，没有拿到具体数据），国内经验谈，1000转（10分钟内）
6：冻存复苏：目前细工最佳方案，DMSO8-10%+FBS40-90%,冻存前我司优化胰酶消化后成单个状态，比吹打成单个活率大大提升。新型冻存液有一年以上冻存复苏案例的，我们可配合免费推广。
离心机研发生产厂家，纳米磁珠分选免疫细胞研发生产厂家，路过可深入讨论，要能共享FAQ,我们可共享验证。
如流式告知型号，最佳培养基和细胞最佳浓度我们做些最佳方案推荐。
死细胞验证：低浓度碘化丙啶（PI），鉴别染料7-AAD告知厂家货号，我们统计下各厂家优略后，讨论试公布参考结果。
自动化培养需冗余试剂配合，我司建系目的，技术老师路过多多支持。
20251010
已完成统计技术组成：难养系、冻存复苏挑剔类，冻存复苏分化、工业应用组相关统计
挑剔组几种应用冻存复苏相关细胞方法统计一段时间了，就痛点原代脑、心肌、腺类单细胞研究冻存复苏活率相关参考，基础还是我司推荐DMSO+胎牛（程序降温法），案例来源已统计并应用在原代PBMC、测序组原代高活率平稳理想，就上述三类冻存复苏活率有需要技术讨论可来信讨论，也建议平时有这类实验时，通过高细胞活率其他类应用，国产试剂与技术方法备份组提前应用并长期验证，包括种子库细胞备份组。耐药株组等挑剔组，其他应用相关冻存复苏需求高的都可讨论，技术理论更新思路已完成，如传统方法不能满足细胞高活率要求，思路来源平时问题统计积累，走简便易行可行路线，可讨论新思路方法验证，后期自动化冻存复苏所需技术提前技术储备。珍贵株需救助可参考我司增强贴壁试剂-免费试用（告知实验室名称，细胞名称，问题描述，救助结果需反馈）
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文献和实验酶！ 痕量的核糖核酸酶便可以破坏 siRNA 实验。因为 RNA 酶存在于整个实验室环境下，包括你的皮肤、任何裸手碰过的物品或者任何在空气中暴露过的物品，所以采取措施防止和消除 RNA 酶污染非常重要。赛默飞针对 RNA 酶的检测和去除提供了全套系列的产品。 5.保持健康的细胞培养和严格的操作方案，以获得良好的转染可重复性。 一般来说，健康细胞的转染效率高于生长状态不佳的细胞。常规的低传代次数的传代培养细胞，可最大限度降低连续细胞系从一个试验到下一个试验过程中的不稳定性。进行优化实验时，我们建议转染
性物质（如51Cr释放实验）或抗体标记（如流式细胞分析）进行定量分析； 3. 需要将多个时间点的不同样本（孔）数据关联在一起，以生成时程曲线，从而可能导致人为因素误差； 4. 检测时缺少环境控制而导致细胞变化，从而可能出现不需要或误导性的实验结果。 Incucyte® 提供全套免疫细胞杀伤方案，可实时查看和自动分析免疫细胞介导的肿瘤细胞杀伤作用，通过这种非侵入性、无干扰性的细胞分析平台对免疫细胞、抗体功能&杀伤能力获取新的见解。Incucyte®免疫细胞杀伤方案适用于研究： - 细胞
-132-997）进行进一步纯化以满足测序要求。 FFPE 样本（福尔马林固定石蜡包埋）：甲醛固定导致蛋白质和核酸发生交联和片段化，无法用于制备活细胞。此类样本同样可以使用商业化试剂盒（130-134-089）分离细胞核进行 snRNA-seq 或使用解离试剂盒（130-118-052）解离分选后进行基因组分析。 自动化样本解离制备细胞平台 （1）传统细胞制备方法的局限性 传统的样本制备方法，尤其是对复杂实体组织（如肿瘤、脑组织、纤维化组织）的处理，长期以来严重依赖手动操作。手动解离
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