moc1/moc2小鼠口腔鳞状细胞癌

细胞名称

moc1/moc2小鼠口腔鳞状细胞癌

细胞品系

C57BL/6 Cxcr3-/-

细胞来源

国外

细胞鉴定

STR鉴定已通过

细胞形态

淋巴母多角形细胞样,贴壁+悬浮生长

培 养 基

DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)(BasMed-AW-013)+FBS 10% + P/S1%500ML完全培养基：IMDM:F10/F12=2:1313ml:157ml培养基+FBS10%(50ml）+2.5mg/500ml胰岛素+20ug/500ml氢化可的松+2.5ug/500ml EGF+ P/S  1% 双抗，1%。

培养条件

气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%

细胞背景

口腔鳞状细胞癌(OSCC)是头颈癌的一个突出子集，头颈癌是全球第六大常见癌症。发生OSCC的主要危险因素是致癌物暴露，将头颈癌的这一亚群与人瘤病毒诱导的头颈癌区分开来。尽管在检测、手术、化疗和放疗方面取得了进展，但OSCC的预后几十年来一直保持稳定。此外，在诊断时，大约三分之二的OSCC患者患有局部晚期疾病，导致发病率和死亡率增加。

细胞用途

仅供科研使用

注意事项

1. MOC1细胞活性特别高，增值速度非常快，不建议传代密度太大，而选择稀一点重铺，等长满80%左右传代的时候，很难消化下来，建议加入0.25%EDTA的胰酶进去后充分混匀所有细胞都接触到胰酶，放置到培养箱进行消化，时长大约是3-4分钟左右后拿出来

2. 在培养器皿的侧边进行拍打帮助细胞脱落，拍打过程大约持续2分钟左右才会脱落大部分细胞，如果脱落比例还不是很多，也可以重新放回培养箱继续消化1-2分钟后再次拿出来进行拍打脱落，等80-90%细胞都脱落后再终止消化，离心重悬再重新铺瓶，分散均匀。

3. MOC2细胞贴壁性和常规细胞类似没有特别牢固。倍增周期也没有MOC1快。采用常规消化方法处理。

常温发货

收到后T25瓶消毒再放置培养箱静置2-3小时后观察密度和状态拍照2-3张反馈给销售，密度达标就可以传代。前期传代比例1:2，等再次长满后传代时建议冻存其中一整瓶成1个1ml冻存管，另外一瓶继续传代，反复冻存2-3只后才扩增做实验，以防突发情况引起断种。

干冰发货

常规细胞发货冻存管2只，复苏1只，另外一只备用，第一个复苏不成功时严格按照厂家要求复苏第二个，均没有复苏成功的情况即时留存复苏照片通知我们。

贴壁细胞

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25％(w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

３. 轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶/6cm培养皿中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

4. 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

５. 运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。

悬浮细胞

悬浮状态下生长的细胞，可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态，一般情况下细胞密度维持在1×10⁵~1×10⁶个/mL(不同细胞对密度要求不同）可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm，离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:4的比例进行。

　生物安全

1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。