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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海抚生
- 库存:
27
- 抗体英文名:
Chicken IgG/APC
- 抗体名:
荧光素APC标记鸡IgG
- 保存条件:
Store at -20℃
- 浓度:
1.0 mg/ml
- 规格:
100ul
英文名称:Chicken IgG/APC
中文名称:荧光素APC标记鸡IgG
别名:Chicken Immunoglobulin G/APC 荧光素APC标记鸡IgG
性状:Liquid
浓度:1.0 mg/ml
保存条件:Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
| 产品介绍:Immunoglobulin G (IgG), is one of the most abundant proteins in serum with normal levels between 8-17 mg/mL in adult blood. IgG is important for our defence against microorganisms and the molecules are produced by B lymphocytes as a part of our adaptive immune response. The IgG molecule has two separate functions; to bind to the pathogen that elicited the response and to recruit other cells and molecules to destroy the antigen. The variability of the IgG pool is generated by somatic recombination and the number of specificities in an individual at a given time point is estimated to be 1011 variants. |
本网站销售的所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
注意事项:
1、一抗种属不同,最好都是单抗,二抗匹配对应的一抗,二抗不同荧光标记。如果可以,二抗最好来自同一宿主物种。
2、一抗是单克隆抗体时:二抗应针对一抗的类或亚类。例如,mouse IgM一抗需要抗mouse IgM二抗。当使用多个亚类特异性一抗时,应使用亚类特异性二抗来区分一抗。例如,使用IgG2和IgG1一抗的免疫荧光双标实验使用抗IgG2和抗IgG1二抗更优。
3、一抗是多克隆抗体时:可以使用IgG二抗,因为大多数多克隆抗体是IgG类免疫球蛋白。
4、为了限制二抗与近缘种的一抗非特异性结合,使用对近缘种预吸附的二抗。例如,抗mouse二抗可能与rat一抗发生交叉反应。使用rat血清吸附的抗mouse二抗可减少交叉反应性。注:谨慎选择对近亲属物种(如rat和mouse)预先吸附的二抗,吸附可消除高亲和力抗体,导致信号减弱。
5、封闭液的选择:封闭液作用就是尽量封闭掉能与二抗结合产生非特异性染色的抗原。所以,封闭液尽量选择与二抗种属同源的血清封闭液。比如,二抗是“donkey抗goat AF488、donkey抗rabbit AF594”,那么最佳封闭液就是donkey血清封闭液。免疫荧光双标实验中二抗种属来源于非mouse、非rabbit、非goat,而是选择donkey、马、鸡等种属来源,并且二抗采用一样的种属来源,这样可以一种来源的血清完成两个抗体的封闭。
6、两种一抗同时孵育,然后两种二抗同时孵育。抗体浓度、孵育时间要自我摸索,一抗4℃孵育过夜比较好。
7、荧光染色后一般在1h内完成观察,或于4℃保存4h,时间过长,可能会使荧光提前衰退。
一抗与二抗的区别:
第一抗体
第一抗体就是能和非抗体性抗原(特异性抗原)特异性结合的蛋白。种类包括单克隆抗体和多克隆抗体。
第二抗体
第二抗体是能和抗体结合,即抗体的抗体,其主要作用是检测抗体的存在,放大一抗的信号。二抗是利用抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质,去免疫异种动物,由异种动物的免疫系统产生的针对于此抗体的免疫球蛋白。用抗AIV H5亚型血凝素单克隆抗体为包被抗体,兔抗AIV IgG为第二抗体。第一抗体就是平常所说的抗体,即能和抗原特异性结合。第二抗体是能和抗体结合的,即抗体的抗体。主要用于检测抗体的存在。一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。也就是说,抗原进入机体刺激机体免疫系统产生免疫应答,由B细胞可以产生与相应抗原发生特异性结合的特殊蛋白质。一抗二抗都是一种可以特异结合别的物质的基团,而且一抗可以至少结合两种其他基团(底物和二抗)。
一抗:可以特异结合底物,就是识别出我们想要检测的东西。一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。二抗:可以和一抗结合,并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗。 如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要二抗。但这样成本很高,因为一种一抗只识别一种底物。所以如今的设计一般是二抗带上可检测标记,再来检测一抗。而一抗识别底物。这样,当一抗结合到底物上,就可以通过二抗检测出来。
下列是公司正在出售的产品:
| 吲哚胺2,3-双加氧酶抗体 | Anti-LRRC26/Cy5.5 |
| 肝黄素单加氧酶2封闭多肽 | Anti-NSD3/Cy5.5 |
| 黑色素瘤抗原F蛋白家族1封闭多肽 | Anti-Pecanex/Cy5.5 |
| 细胞色素P450 1A1封闭多肽 | Anti-EDG1/Cy5.5 |
| VSV-G tag多肽 | Anti-STK35/Cy5.5 |
| 磷酸化脑胶质瘤相关蛋白封闭多肽 | Anti-HOPX/Cy5.5 |
| 磷酸化GATA结合蛋白2封闭多肽 | Anti-USP16/Cy5.5 |
| 淋巴细胞抗原6G封闭多肽 | FLJ27365 Antibody Blocking Peptide |
| 脑特异性POU结构域同源盒基因3C封闭多肽 | Anti-Phospho-TAK1(Ser192)/Cy5.5 |
| 肿瘤抑制基因NME2封闭多肽 | Anti-FMDV/Cy5.5 |
| 蛋白酪氨酸磷酸酶2封闭多肽 | Anti-Iumbrokinase/Cy5.5 |
| 磷酸化生肌决定因子Myf5封闭多肽 | Anti-ER81/Cy5.5 |
| Smad7封闭多肽 | 荧光素APC标记鸡IgGAnti-CKAP1/Cy5.5 |
| 肿瘤坏死因子配体超家族成员12A封闭多肽 | Anti-Connexin-37/Cy5.5 |
| G蛋白偶联受体124封闭多肽 | Anti-Renalase/Cy5.5 |
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文献和实验当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基,一般最多能结合15~20个,一个IgG分子可结合2~8个分子的FITC,其反应式如下FITC-N=C=S + N-H2-蛋白质 → FITC-NS-C-N-H2-蛋白质常用Marsshall(1958)法标记荧光抗体,也可以根据条件采用Chadwick等标记法或Clark
用于标记的抗体,要求是高特异性和高亲和力的。所用抗 血清 中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取igg后再作标记。作为标记的荧光素应符合以下要求:①应具有能与蛋白质分子形成共价健的化学基团,与蛋白质结合后不易解离,而未结合的色素及其降解产物易于清除。②荧光效率高,与蛋白质结合后,仍能保持较高的荧光效率。③荧光色泽与背景组织的色泽对比鲜明。④与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的生化与免疫性质。⑤标记方法简单、安全无毒。⑥与蛋白质的结合物稳定
( 一 ) 原理 目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素 (Fluorescein isothiocynate,FITC) 或罗达明 (Lissamine rhodamine B200, RB200) 。在硷性条件下 FITC 的碳酰胺键可与抗体赖氨酸的ε氨基共价结合,标记后的抗体仍保持与相应抗原
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