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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
PI:3PS Lipid Kinase Substrate, 0.5mg
- 供应商:
普洛麦格
- 规格:
0.5ml
说 明:
磷 脂 酰 肌 醇 (PI) 及 其 磷 酸 化 衍 生 物, 统 称 为 磷 酸 肌 醇(Phosphoinositides),是重要的第二信使,而第二信使作为信号分子在细胞膜重构中起关键作用。它们由一类被称为磷酸肌醇脂质激酶(Phosphoinositide Lipid Kinases, PIKs) 的激酶家族催化产生。在哺乳动物中,已确定 19 个 PIK 亚型。根据其对磷酸化肌醇环第 3、 4、 5位羟基基团磷酸化偏好,大致分为三个主要的家族:磷酸肌醇 3- 激酶(PI3Ks),磷脂酰肌醇 4- 激酶 (PI4Ks) 和磷酸肌醇磷酸 - 激酶 (PIP5Ks和 PIP4Ks)。Promega 脂 质 激 酶 活 性 检 测 系 统, 利 用 ADP-GloTM KinaseAssay 激酶活性发光检测平台,为脂质激酶反应提供了整套完备试剂。这些试剂包括纯化的人 I 类 PI3Ks 重组蛋白,优化的反应缓冲液和即用型脂质激酶底物。用户既可单独购买酶,也可购买整套完备试剂盒PI3K-GloTM Class I Profiling Kit 组分包括 PI3Ks (α、β、γ、δ,各 5μg), PIP2: 3PS 脂质激酶底物 (0.25mg) 和 ADP-Glo ™激酶检测试剂盒 (1,000 次 )。底物以冷冻小单层脂质体形式提供,为磷脂酰肌醇(PI)或磷酸肌醇 -4,5- 二磷酸 (PIP2) 与载脂磷脂酰丝氨酸 (PS)的混合物,两者混合比例为 1:3。 PI 与 PS 1:3 混合优化后的底物可用于 I 类 PI3Ks。已证实, PI 与 PS 1:3 混合后的底物可被大多数 PI3K家族成员识别,可作为通用型 PI 脂质激酶底物。检测原理: 将脂质激酶底物 (PI:3PS 或 PIP2:3PS)、重组脂质激酶和ATP 共同孵育进行脂质激酶反应,之后用 ADP-GloTM 激酶检测试剂盒检测激酶活性。 ADP-GloTM 激酶检测试剂盒操作分两个步骤: 1)激酶反应后,加入 ATP 耗竭试剂终止激酶反应,同时耗尽所有剩余ATP,只留下 ADP; 2) 加入激酶检测试剂,将 ADP 转变为 ATP ,同时在偶联的萤光素酶 / 萤光素反应中将 ATP 转变为光信号。
特点:
提供 I 类 PI3Ks 活性检测完整解决方案:
• 纯化的高特异性人源重组酶。
• 即用型脂质底物 ( PI 或 PIP2)。
• 通用反应缓冲液。
• 高灵敏度检测。
选择性卓越: 即使在低底物百分转化率下,仍可获得高信噪比。结果可靠: 动态范围宽、背景低、灵敏度高,减少了数据的不可靠性。节约时间: 均质检测,简便的 " 加样 - 读数 " 模式。避免假阳性结果: 特殊配方和发光检测降低了假阳性率。节约经费: 可轻松升级至 1,536 孔板检测模式,降低每孔检测成本。
储 存 条 件: PI3K 重 组 酶 (Recombinant PI3K Enzymes): 储 存于 –65℃以下。 脂质底物: 储存于 –65℃以下。 缓冲液: 5X PI3KReaction Buffer, 10X Lipid Dilution Buffer 和 1M MgCl2 储存于 –30℃到 –10℃。 ADP-GloTM 检测试剂盒: 收到试剂盒后,将 ATP 取出并储存于 –65℃以下,其余组分储存于 –30℃到 –10℃。
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文献和实验Measuring PI3K Lipid Kinase Activity
. In this chapter, we describe methods to measure the PI3K lipid kinase activity in vitro, which is the standard procedure to test the efficacy of inhibitors.
Phosphoinositide (PI) 3-Kinase Assays
, is described here together with a series of modifications of substrate and assay conditions that will aid researchers in the identification of the particular class and isoform of PI 3-kinase that is involved in a signaling process under investigation.
erythrocyte2005 看到分型Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ pi3k的分型是依据什么?各型有什么差别? ylhuang0502 "The classifications are based on primary structure, regulation, and in vitro lipid substrate specificity." You may check the following website
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