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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
普洛麦格
- 英文名:
MagneSil® ONE, Fixed Yield Blood Genomic System
- 规格:
1 × 96 preps
说明:
核受体检测可以通过传统的方法即利用上游带有核受体反应元件的最小启动子载体来完成。您也可以选择病毒元件像小鼠乳腺肿瘤病毒长末段重复启动子来检测雌激素或糖皮质激素的响应( 如pGL4.36)。很多情况下,利用这些方法进行的研究需要选择含有合适的内源核受体的细胞系,就是说每一种核受体的研究可能需要选择不同的细胞系。利用酵母双杂交原理的方法也适用于核受体的研究。核受体配基结合域与GAL4 DNA 结合域相融合,通过上游含有GAL4 上游激活序列的重复片段的最小启动子的萤火虫萤光素酶载体转染至细胞中。配基结合区域会与配基结合形成同源或异源的二聚体,以及与激活因子或抑制因子相互作用。这种单杂交系统可帮助您在很多细胞系中研究您所感兴趣的核受体。
特点:
. 强劲:基于GAL4 的系统从内源性受体中去除了背景信号。
. 更灵敏:9X GAL4 经过优化,反应性增强,信噪比更高。
. 适应性强:海肾/ 新霉素的组合标记的引入,使得只需一个载体,既可用双萤光素酶检测试剂盒进行归一化,又可用选择性标记筛选生成的稳定细胞系。
. 稳定如一:仅需使用一个实验体系,就可以将所有的核受体进行比较或者研究其特征。
. 更快得到结果:去稳定化的luc2P 的萤光素酶报告基因经过优化,具有更高的灵敏度和更短的诱导时间。
储存条件:储存于-20℃。
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文献和实验Automated Genomic DNA Extraction
genomic DNA from 10-20 µl blood samples. The volumes given are on a per sample basis. Start with 96 x 10-20 µl blood samples in a 96 x 2 ml deep well plate. Add 500 µl of Lysis Mix and incubate at room temperature for 10 minutes
DNA extraction from Mutation Detection Enhancement (MDE) Gel Stained with Silver Nitrate
extension cycle at 72 ˚C for 5 min. PCR reactions were performed in Gene Amp® PCR System 480 (Perkin-Elmer, Norwalk, CT, USA). DNA samples of normal subjects (blood donors) were included as well as negative control (with no DNA sample) in each reaction.
DNA extraction from Mutation Detection Enhancement (MDE) Gel
is completely air dried and dissolved in 10-20µl H 2 O overnight at 37℃. All reagents were purchased from sigma (Corning®; Sigma Chemical). The yield of DNA from a single band was usually too week to be visualized on agarose gel stained with ethidium
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