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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
HaloTEV Protease
- 供应商：
普洛麦格
- 规格：
4000u
说明：
HaloTag® Mammalian Protein Purification System (HaloTag®哺乳动物蛋白纯化系统， Cat.# G6790) 是专为从哺乳动物细胞培养裂解液中纯化 HaloTag® 融合蛋白而优化的试剂盒。 HaloTag® 融合蛋
白与 HaloLinkTM 树脂形成高度特异的共价键，这种特异性极高的共价结合可以从培养的哺乳动物细胞中纯化并回收到纯度极高的重组蛋白，即使表达水平低时也不受影响。 HaloTag® Mammalian ProteinDetection and Purification System (HaloTag® 哺乳动物蛋白检测和纯化系统， Cat.# G6795) 中还包括 HaloTag® TMRDirectTM Ligand(HaloTag® TMRDirectTM 配基 )。简单易用的 HaloTag® 融合蛋白的荧光检测方便了表达和纯化条件的快速优化。
特点：
• 纯化效率高： HaloLinkTM 树脂可以共价结合超过 7mg/ml 的HaloTag® 融合蛋白，是 FLAG® 结合能力的 10 倍多。回收效率很高，普遍高于 75%。
• 纯度更高： 共价捕获使得在广泛的和 / 或严格的洗脱过程中，不会丢失结合的蛋白，非特异结合率极低 (<0.1%)，蛋白纯度很高。
• 易于扩展： 规格可向上或向下扩展，对得到 mg 级以上的蛋白量非常重要。
• 为哺乳动物蛋白表达而优化： HaloTag® 平台使得用单一载体在纯化、 pull-down 和细胞成像间的灵活移动成为可能。
储存条件： 将离心柱储存于室温， HaloLinkTM 树脂储存于 4℃，HaloTEV 蛋白酶， TMRDirectTM 配基及蛋白酶抑制剂混合物粉末储存于 -30℃到 -10℃。配制好的蛋白酶抑制剂混合物可在 2-10℃保存12 个月。
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文献和实验制备过程中的去垢剂、酶抑制剂或不适合的酶切条件等。 案例分享 以下例子使用 2 个串联的 GSTrap FF 5ml 预装柱纯化 TLP40 蛋白。 添加的 PreScission Protease 酶量为 2U/100 µg GST 标签蛋白。 根据 GSTrap FF 预装柱大小，用一定体积的 PreScission buffer对PreScission Protease 进行稀释 (如对于 5 ml 预装柱，可用 4.5 ml
Dissecting the Urokinase Activation Pathway Using Urokinase-Activated Anthrax Toxin
sequence of PrAg with other protease substrate sequences. PrAg-U2 is such a PrAg variant, one that is selectively activated by urokinase plasminogen activator (uPA). The uPA-dependent proteolytic activation of PrAg-U2 on the cell surface is readily detected
. Cells were harvested at 90% confluency and washed to remove contaminants. Cell pellets were lysed for 1 hour at 4°C in buffer containing protease inhibitors and the crude lysates clarified by centrifugation and stored on ice. Confirmation
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