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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
普洛麦格
- 英文名:
HaloTag® Standard Protein
- 规格:
30µg
说明:
蛋白阵列能够平行分析多组蛋白 :蛋白、蛋白 :药物或者蛋白 :核酸之间的相互作用。 HaloLinkTM Protein Array Systems(HaloLinkTM蛋白阵列系统 ) 提供了一种新的创建自制 ( 按用户需求 ) 蛋白阵列的方法,该方法是创新的 HaloTag® 技术、表面材料工程以及无细胞蛋白表达系统等优势的结合。HaloTag® 蛋白是一个突变的水解酶,能够与 HaloTag® 配基形成共价结合。在生理条件下,该结合反应快速、特异性高,得到的复合物在苛刻条件下依然能够保持稳定。使用 HaloLinkTM 蛋白阵列系统时,在无细胞表达系统中表达出 HaloTag® 蛋白,然后在水凝胶包被的玻片上被共价捕获,该玻片连接着 HaloTag® 配基。在无细胞表达系统中产生的融合蛋白无需预先纯化,可以直接用于蛋白捕获。使用这种方法可以在玻片表面同时快速合成和固定多个融合蛋白。在不到8 小时内,可以完成包括表达蛋白、制定蛋白阵列布局和分析蛋白相互作用在内的一整套实验。HaloLinkTM Array Six Slide System(HaloLinkTM 阵列六玻片系统 ) 内含 HaloLinkTM 玻片、 HaloLinkTM 密封垫和抗 HaloTag® 抗体。欲使用六玻片系统,您需要自己准备蛋白表达系统或者订购 TNT®T7 Quick Coupled Transcription/Translation System (Cat.# L1170或 L1171) 或 TNT® SP6 High-Yield Wheat Germ Protein ExpressionSystem (Cat.# L3260 或 L3261)。六玻片系统中不包含 HaloTag®Standard Protein (HaloTag® 标准蛋白, Cat.# G4491),但可以单独购买。HaloTag® 技术提供了一种快速和简便的方法,通过荧光HaloTag® TMR 配基标记加上 SDS-PAGE 分析来检测 HaloTag® 融合蛋白的表达。 HaloLinkTM Protein Array 技术手册 (TM310) 中有操作指南。Protein G HaloTag® Fusion Protein (Protein G HaloTag® 融合蛋白, Cat.# G7291) 由一个来自链球菌的不含白蛋白结合结构域的重组 Protein G 和 HaloTag® 蛋白组成。 Protein G HaloTag® 融合蛋白分子量为 58kDa,可共价结合到不同的氯代烷表面、活性和荧光HaloTag® 配基上。该融合蛋白使得抗体定向结合于 HaloLinkTM 蛋白芯片上。
特点:
• 快速生产蛋白: 无细胞表达系统可以在单管中用偶联的转录 / 翻译方式快速生产目的蛋白,用于蛋白阵列实验。
• 蛋白捕获是不可逆的: 使用其它亲和标签进行捕获的蛋白易于从结合物的表面脱离下来,本方法与此不同, HaloTag® 融合蛋白与 HaloLinkTM 玻片是共价结合的。
• 无需蛋白纯化步骤: 目的蛋白直接从无细胞表达反应体系中被捕获。
• 非特异结合减少: HaloLinkTM 玻片具有独特的水凝胶包被,此设计可以防止非特异结合,同时保护特异结合的蛋白的功能。
• 可耐受反复冲洗: HaloTag® 融合蛋白和 HaloLinkTM 玻片的共价结合可耐受反复而严格的冲洗,这能减少背景和降低假阳性率。
• 无需机械手: 每个阵列为 50 个点,可手工完成多个相互作用的同时研究,无需复杂的机械手。
• 高效的抗体结合: 与其它直接捕获的方法相比, Protein G HaloTag®融合蛋白增强了抗体与表面的结合。
储存条件: HaloTag® 标准蛋白、抗 HaloTag® 抗体和 Protein GHaloTag® 融合蛋白储存于 –20℃。 HaloLinkTM 蛋白阵列玻片应该储存于 -20℃,并在使用前才打开。打开后,未使用的玻片应储存于 -20℃,并应在一个月内使用。 HaloLinkTM 阵列密封垫储存于室温中。
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文献和实验Mag-Bind® mRNA Protocol (Standard Protocol)
capable of 12,000 x g and 2-8°C 实验步骤 Total RNA Isolation: 1. Homogenization and lysis of samples: follow either method below. 1) Tissue Samples Homogenize tissue samples in 1.5 mL of RNA-Solv ® Reagent per 100
analysis of gene expression (DSAGE) measures global gene transcript levels from only 1 to 2 µg total RNA by massively parallel sequencing of cDNA tags. This unit describes the construction of 21?bp cDNA tag libraries appropriate for massively parallel
-Rad® 宽范围标准品,1:50稀释;(5) BSA ,6 μg;(6) MagicMark™ XP标准品;10 μL;(7)人IgG,6 μg;(8)人IgM,6 μg;(9)大肠杆菌裂解液,10 μg;(10) Novex® Sharp未染色标准品,10 μL。 误区:预制胶太贵了 事实:使用Novex® 预制胶不仅能节约时间和宝贵的样品,还能节约经费 30多年来传统的凝胶分离基本没变。使用Novex® 预制胶带来以下明显
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