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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
pGL4.27 [luc2P/minP/Hygro] Vector
- 供应商:
普洛麦格
- 规格:
20µg
说明:
构建一个可以检测某一功能信号通路的细胞系,可以有助于解译参与这一信号通路的信号分子。这些工具载体是通过在载体的最小启动子的上游插入多个反应元件重复序列而获得的。Promega 利用pGL4 骨架上优化的luc2 萤火虫萤光素酶基因设计了一系列载体,可对多条通路的活性进行检测。这些载体上还包含一个潮霉素抗性筛选基因,既可用于瞬时转染,也可用于筛选稳定转染细胞系。我们提供含有三种经过改造的不同萤火虫萤光素酶基因(luc2 、luc2P 或luc2CP ) 的最小启动子载体。luc2 基因经过改造,去除了大部分隐藏的转录因子结合位点,并通过编码优化提高了在哺乳动物细胞中的表达效率。luc2P 、luc2CP 和RapidResponseTM 基因是在luc2 基因的基础上增加了降解序列,从而可以调控luc2 基因在细胞中的半衰期。RapidResponseTM 基因对刺激的响应更快,但是以牺牲信号强度为代价。luc2P 基因( 半衰期为1 个小时) 反应比luc2 基因( 半衰期为3 个小时) 快,信号强度也适合,而luc2CP 基因( 半衰期为0.4 个小时) 反应更快但信号强度最弱。最小启动子载体有含筛选标签( 潮霉素) 和不含筛选标签的可供订购。为了提高实验效率,一些预设的反应元件载体已经整合到了pGL4.27 载体中。其中一些载体也可订购其稳定表达的细胞系(GloResponse ™细胞系)。
特点:
• 预设的载体不再需要克隆和验证检测。
• 增强的报告基因表达水平:为了更适于哺乳动物细胞的表达,将合成的基因密码子进行了优化。
• 降低了表达产物的背景和危险:去掉了隐藏的DNA 调控元件和转录因子结合位点。
• 瞬时应答更快:Rapid ResponseTM 技术应用了去稳定萤光素酶基因。
• 可轻松地从瞬时转换到稳定细胞:有多种哺乳动物细胞筛选标记可供选择。
储存条件:储存于-20℃。
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文献和实验Improved HSV-1 Amplicon Packaging System Using ICP27-Deleted, Oversized HSV-1 BAC DNA
-1-based vectors. Two distinct types of vectors, recombinant and amplicon, have been reported. Recombinant HSV-1 vectors use most of the viral genome as the vector backbone and can carry one or more gene(s) of interests inserted in place of the viral genes
amino acid protein with a molecular weight of 27 kD (2 ). Wild-type GFP emits a vibrant green fluorescence upon exposure to blue light (450-490 nm). The signal is detectable by fluorescence microscopy and fluorescence-activated cell sorting (FACS
的作用是调控基因表达。例如组蛋白甲基化多导致基因沉默,去甲基化则相反;乙酰化一般是转录激活,去乙酰化则相反。当然,也可在此基础上产生复杂的生物学效应。例如组蛋白去乙酰化酶 HDAC 可影响免疫系统;H3K4me3、H3K9me2 能够调控记忆的形成, 而且 H3K 甲基化与 X 染色体失活、基因组印记和异染色质形成有关;H3 乙酰化通过多种机制调控以来 ATP 的染色质重塑 ,并参与炎症反应;H2A、H2B 泛素化则与 DNA 损害反应有关;而 H3S28 磷酸化与 H3K27 乙酰化可激活转录
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