- ￥3000
- 雅吉生物
- 上海
- YS1013C
- 2025年07月05日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
ATCC
- 库存：
100
- 细胞类型：
ATCC
- 品系：
ATCC
- 组织来源：
ATCC
- 相关疾病：
ATCC
- 物种来源：
ATCC
- 免疫类型：
ATCC
- 细胞形态：
ATCC
- 是否是肿瘤细胞：
ATCC
- 器官来源：
ATCC
- 运输方式：
顺丰快递
- 年限：
ATCC
- 生长状态：
ATCC
- 规格：
T25瓶
人非小细胞肺癌细胞A549/LUC收到后处理
培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是运输细胞的最好办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶，消毒后放到超净台内严格无菌操作，将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处理。显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（最好40x,100x,200x各一张），前三天照片是重要售后依据，不提供照片默认收到状态良好。（传代后建议一瓶用原瓶的完全培养基，另外一瓶用自己配的完全培养基，以便进行对比培养，换液后将瓶盖拧松）
细胞培养步骤
a、细胞传代：如果未超过80%汇合度时，将瓶装的完全培养液收集至离心管中，留5ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；如果细胞密度超80%，即可进行传代培养，传代具体步骤如下：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，使之完全脱落后吸出，然后将悬液转移至15ml离心管中，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL完全培养基重悬。
4. 将细胞悬液按1：2的比例进行分瓶传代（两个T25瓶），补充新的完全培养基至5-8ml/瓶，最后放入到37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养。
b、细胞冻存：
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃T25培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入5ml完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心 5min；
3、 弃上清，沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液（货号：C7001），混匀后加入冻存管中。
4、 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可，如后期要将细胞转入液氮罐中，则需在-80℃冰箱 中存放24小时以上再转入液氮罐中。
C、细胞复苏：
1、从液氮中取出细胞冻存管（注意佩戴防护面具），快速将其置入 37℃水浴中解冻， 直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3、弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种至T25培养瓶，放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养；
4、第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
注意事项：有些细胞贴壁不牢，在运输过程中容易发生细胞脱落，这是正常现象。如脱离较多可将培养瓶所有培养液收集至离心管，1000rpm离心5min，收集上清作过渡培养（后期对比培养），沉淀加入胰酶1-2ml，轻轻吹打，重悬，消化1-2分钟后，加5ml完全培养基终止反应。再离心，弃上清，加1-2ml完全培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代（两个T25），补充新的完全培养基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养。
人非小细胞肺癌细胞A549/LUC售后条款：
1）细胞出现问题，可重发的情况有哪些？判定标准是什么？
1. 细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发；
2. 细胞污染问题，请在收到产品48小时内，给我们提出真实的实验结果，核实后重发；
3. 常温发货的细胞静置24小时后，干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后，绝大多数细胞未存活，（需提供真实清晰的细胞状态照片），重发；
4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封，出现污染，重发；
5. 细胞活性问题，请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，核实后予重发；
6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照，3天未告知的，视为产品合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的，并跟技术人员沟通的，由技术人员判定为我方责任的，重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。
2）细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
1. 客户造成细胞污染，不重发；
2. 客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
3. 非本库推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
4. 细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
5. 细胞培养时经其它处理的，不重发；
6. 细胞收到2天内，未告知，不重发；
7. 视具体情况而定。
欢迎新老客户咨询订购：人非小细胞肺癌细胞A549/LUC
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文献和实验superskyfly 我自己都觉得我自己很牛，千百人都做出来的试验，我就是做不出来。质粒用的是Promega p4.32-NF-kB-Luc, 转染用的是Invitrogen的Lipofactamin, 激活用的是Sigma生产的PMA和PHA-P,Assay用的是Promega dual,结果加了PMA和PHA的和不加的读数几乎没有区别。加了compound的和不加的也没有区别。 用过PC3, Jurkat, A549，HCT116都是一样。
细胞也有身份证么？有啊，包括他的基因突变、表达、耐药，等等……要是不知道这些怎么选来做实验呢？
应该有很多童鞋都养过细胞，即使没有养过细胞，也看到过别人在文献里用各种细胞系吧……但是对于细胞系的认识，估计大家读仅限于ATCC上。其实，对于细胞系更深层的注释，其实可以在这里查到：细胞模型护照……在这个界面上，可以直接搜索你想要的细胞系名称。或者你也能根据下面这个转盘，来选择你想要的细胞类型，特别是肿瘤细胞。比如我们搜个非小细胞肺癌的细胞系，这个就在内圈的肺癌中的NSCLC里面：会给你们弹出一串列表，这个就是现有的非小细胞肺癌的细胞系列表：左边的侧边栏可以根据你们的进一步需要，再进行一轮筛选
为何癌症肝转移的患者治疗效果差，邹伟平等 Nat Med 揭示其中的免疫抑制新机制！
疗法可能真正对这些患者的预后产生积极的影响。」Micheal Green 在接受采访时提到。Micheal Green 与 余家力博士为共同第一作者，同时也是通讯作者之一。 密歇根大学罗格尔癌症中心的交叉学科团队在这项研究中对该中心接受免疫治疗的 718 位患者的数据进行分析。患者们具有不同的癌症类型，包括非小细胞肺癌、黑色素瘤、尿路上皮癌、肾细胞癌等，并且已扩散到了不同的器官，包括肝脏和肺部的转移。 其中，肝脏转移的患者对免疫治疗响应情况更差。值得注意的是，这部分患者的全身性转移相比其他尚未发生
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