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Pectin Esterase (PE) Activity Assay Kit
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上海吉至生化科技有限公司
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文献和实验pectin pectylhydrase之常用名,亦称为果胶酶、果胶甲酯酶、果胶氧化酶。为催化果胶的甲氧酯水解产生果胶酸和甲醇反应的酶。 EC3· 1· 1· 11。除广泛分布于高等植物外,已知在霉菌、细菌中也存在。对脱酯反应的底物特异性尚不十分清楚。因此酶在高等植物中几乎仅作用于甲酯,所以有对此酶应使用果胶甲酯酶这一名称的意见。活性测定是以果胶为底物,对在一定条件下产生的羧基用碱定量;另也有通过对所产生的甲醇进行定量的方法。最适 pH为 8— 4,视酶源而异。一些阳离子特别是 Na
一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
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