兔NK细胞丨兔原代细胞丨逸漠(immocell)

兔NK细胞丨兔原代细胞丨逸漠(immocell)

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  • ¥7450
  • 逸漠/IMMOCELL已认证
  • IMP-RA103
  • 厦门
  • 2025年07月26日
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    • 详细信息
    • 技术资料
    • 品系

      兔原代细胞

    • 细胞类型

      贴壁生长

    • 肿瘤类型

      详询

    • 供应商

      厦门逸漠生物科技有限公司

    • 库存

      999

    • 英文名

    • 生长状态

      正常

    • 年限

      原代

    • 运输方式

      复苏发货或干冰发货(顺丰快递)

    • 器官来源

      详询

    • 是否是肿瘤细胞

      详询

    • 细胞形态

      圆形或椭圆形细胞,不规则细胞样

    • 免疫类型

      详询

    • 物种来源

    • 相关疾病

      详询

    • 组织来源

      外周血

    • 规格

      5*10^5

    一、背景介绍

    自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)是机体重要的免疫细胞,不仅与抗肿瘤、 抗病毒感染和免疫调节有关,而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生。一种稳定表达在NK和LAK细胞表面的LAK-1分子,120kDa,NK细胞在IL-2条件下培养20天LAK-1仍为阳性,而HNK-1(CD57)和CD16部分消失。LAK的杀伤活性可被抗LAK-1 McAb所抑制。
    自然杀伤细胞刺激因子(natural killer cell stimulatory factor,NKSF) 对NK细胞有刺激作用。IL-2、IL-12、IFN-α、TNF-α以及白细胞调节素(leukoregulin,LR) 对NK细胞的活化和分化有正调节作用, 体外培养时加入上述细胞因子可明显提高NK的杀伤活性。前列腺素 (PG)E1、E2、D2和肾上腺皮质激素等对NK细胞的活性有抑制作用。

    二、产品基本信息

    细胞名称:兔NK细胞

    种属来源:兔

    组织来源:外周血

    细胞形态:圆形或椭圆形细胞,不规则细胞样

    生长特性:贴壁生长

    培养基:: 专用培养基

    生长条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃

    传代方法:1:2至1:3,每周2- 3次

    冻存条件:无血清冻存液,液氮储存

    支原体检测:无

    三、细胞培养操作

    1)复苏细胞:将含有1 mL兔NK细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有兔NK细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将兔NK细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL完全培养基,培养过夜)。第三天换液并检查兔NK细胞密度。

    2)细胞传代:如果兔NK细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

    a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

    b、加入0.25%Trypsin-0.02% EDTA消化液于培养瓶中(T25瓶1-2ml,T75瓶2-3ml),使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加3-4ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。

    c、将兔NK细胞悬液按1:2比例分到新的含6-8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。

    3)细胞冻存:待兔NK细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;

    a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。

    b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使兔NK细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。

    c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

    四、产品使用

    1)本产品仅能用于科研

    2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核

    3)本产品未通过用于活体诊断的审核

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