原代肝卵圆细胞培养体系

二、细胞培养状态
在技术部标准操作流程下，建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
使用方法
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          

3. 细胞收货
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
 公司正在 销售的产品：
大鼠L选择素(L-Selectin/CD62L)试剂盒ELISA　Annexin A8(ANXA8)ELISA Kit
大鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA检测试剂盒　Annexin A7(ANXA7)ELISA Kit
大鼠单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)elisa试剂盒　Annexin A6(ANXA6)ELISA Kit
大鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)试剂盒elisa　Annexin A5(ANXA5)ELISA Kit
大鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)检测试剂盒elisa　Annexin A4(ANXA4)ELISA Kit
大鼠巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒　Annexin A3(ANXA3)ELISA Kit
大鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)试剂盒ELISA　Annexin A2(ANXA2)ELISA Kit
大鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA检测试剂盒　Annexin A13(ANXA13)ELISA Kit
大鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)elisa试剂盒　Annexin A11(ANXA11)ELISA Kit
大鼠基质金属蛋白酶10(MMP-10)试剂盒elisa　Annexin A10(ANXA10)ELISA Kit
大鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)检测试剂盒elisa　Annexin A1(ANXA1)ELISA Kit
大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA试剂盒　Membrane Cofactor Protein(MCP)ELISA Kit
大鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)试剂盒ELISA　Wiskott Aldrich Syndrome Protein Family, Member 2(WASF2)ELISA Kit
大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)ELISA检测试剂盒　Wiskott Aldrich Syndrome Protein(WASP)ELISA Kit
大鼠基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶(MMP-8)elisa试剂盒　Tyrosine Kinase With Immunoglobulin Like And EGF Like Domains Protein 1(Tie1)ELISA Kit
原代肝卵圆细胞培养体系大鼠5核苷酸酶(5-NT)试剂盒elisa　Immunoglobulin Superfamily, Member 16(IGSF16)ELISA Kit
大鼠骨保护素(OPG)检测试剂盒elisa　Immunoglobulin Lambda(Igl)ELISA Kit
大鼠B因子(BF)ELISA试剂盒　Immunoglobulin Kappa(Igk)ELISA Kit
四、注意事项
1、使用产品时应注意无菌操作，避免污染。
2、本产品含有血清和双抗，如无特别需要不用额外再添加血清和双抗，可以直接使用。
3、为保持本产品的最佳使用效果，不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。
4、所有产品请于保质期内使用，超出保质期，必须放弃使用。
5、本产品只供进一步科研使用，不可应用于临床等其他方面。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。