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文献和实验大多数朋友说推荐培养液为DMEM加10%胎牛血清,1%谷氨酰胺,我们这里用1640加10%新生牛血清,效果也不错。DMEM不容易观察,有时候等DMEM黄了的时候,细胞已经严重缺乏养料,1640颜色变化比较明显,也比较符合细胞当时的情况。细胞置于5%CO2、37度培养,细胞生长较快,根据你留在瓶里细胞的数量,50%两天后传代一次。0.25%胰酶+0.01%EDTA消化,该细胞容易抱团,我是一般先用胰酶洗一下,然后加胰酶37度,观察细胞形态变化,细胞变圆时,倒掉胰酶,加入培养液,吹打重悬
相关专题 总有一种转染方法适合你 geniusma问: 准备做hepg2的转染试验了,实验室常用的的是lipofectamine 2000,听说hepG2的转染效率很低,并且这种细胞比较容易成团,这会影响转染效率吗?是否用trypsin+EDTA 可以使其成为单个细胞不成团?哪种转染方法更适合hepg2?需要改用电转吗?如果用lipofectamine 2000,加入的比例如何?请有经验的朋友告知详细情况,谢谢
geniusma问:准备做hepg2的转染试验了,实验室常用的的是lipofectamine 2000,听说hepG2的转染效率很低,并且这种细胞比较容易成团,这会影响转染效率吗?是否用trypsin+EDTA可以使其成为单个细胞不成团?哪种转染方法更适合hepg2?需要改用电转吗?如果用lipofectamine 2000,加入的比例如何?请有经验的朋友告知详细情况,谢谢!丁香园网友starry913认为:HepG2用lipo2000在我们实验室做的转染效率很高的,可以到70-80%,不必
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