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冻存或复苏
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文献和实验littleyan0418 我现在的任务是要构建人肺癌细胞的cDNA文库,但我不是这个方面科班出身,好多地方还不是很明白,想请教师兄师姐的经验,应该注意些什么。现在对总RNA的提取我有点找不出头绪。麻烦师兄师姐们可以给我分享些这方面的资料和网址吗?非常感谢!! neuronboy http://www.takara.com.cn/ 价格、试剂盒和说明书都有。呵呵 littleyan0418
问: A549细胞到底是如何形态?我见过三角形,近乎MDCK细胞形态的,还有的呈长梭形。我感觉自己的细胞好像混进了MDCK细胞。大家帮忙诊断一下,谢谢。 我培养的A549细胞 答1:
我也在养A549细胞,也来讲讲自己的经验,希望大家共同学习。我们主要是看细胞的密度,大概有80-90%铺满培养瓶底就可以传代了,时间长短不一,大概有5-7天吧,一瓶一般传3-4瓶,中间一般会有一次换液的。培养基用的是1640+10%的小牛血清+200u/ml庆大霉素。传代时先倒掉就培养基,然后用PBS洗一两次,然后再用0.25%胰酶消化(100ml培养瓶盖住表面大概要两滴管左右),可镜经下观察细胞间已出现细胞胞质回缩变圆,缝隙变大(我的细胞大概要2min左右),即可倒去消化液,加入培养基,吹打
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