PCR八联管，0.2ml, 自然色，管盖一体，独立开盖，圆盖

初学者如何尽快学会 PCR 实验？

聚合酶链反应即 PCR 实验，是最基础最常用的实验之一，很多科研汪刚进入实验室的时候，经常被要求尽快掌握好 PCR 技术。但实验装备有限，经费又要节约，没有练习的机会，怎么提高技能呢？最好的办法当然是能自己解决实验装备，就可以随心所欲的练习啦。1 NEST PCR 八联管适用于普通 PCR 和 qPCR 反应，薄壁设计产生高热传导率，使管内反应液以最快速度达到目标温度。采用电子束灭菌，无人类 DNA 酶、无 RNA 酶、无 PCR 抑制物，可高温高压灭菌（121℃）。管盖密封性良好，开盖

重组子的检测

片段可能性扩增可达 2 35 倍。 [ 器材 ] 1 ． PCR 扩增仪 2 ．掌式离心机 3 ． 0. 2ml PCR 管 [ 试剂 ] 1 ． Taq DNA 聚合酶 2. 10×PCR 反应缓冲液 3. 2. 5 mmol/L dNTP 4. 50 mmol/L MgCl 2 5. 模板 DNA 6. 上游引物 7. 下游引物 8. 标准 DNA [ 实验步骤 ] 1. 以质粒 DNA 为模板进行 PCR 扩增。 PCR 反应总体积为 20 μl ，反应液组成：2. PCR 反应程序设

qPCR常见问题及其分析

值出现过晚（Ct>38）扩增效率低: 反应条件不够优化。设计更好的引物或探针；改用三步法进行反应；适当降低退火温度；增加镁离子浓度等。PCR各种反应成分的降解或加样量的不足。PCR产物太长: 一般采用80-150bp的产物长度。3. 标准曲线线性关系不佳加样存在误差: 使得标准品不呈梯度。标准品出现降解: 应避免标准品反复冻融，或重新制备并稀释标准品。引物或探针不佳: 重新设计更好的引物和探针。模板中存在抑制物，或模板浓度过高4. 负对照有信号引物设计不够优化：应避免引物二聚体和发夹结构的出现。引物