T2毒素检测试剂盒（酶联免疫法）

T2毒素检测试剂盒（酶联免疫法）
一、原理及用途
T2毒素（T2）是由多种镰刀菌产生的一种霉菌毒素。主要污染小麦、大麦、玉米等粮食作物及其制品，对人类健康及畜牧业构成了较大危害。T2毒素主要影响血液，肝脏，肾脏，胰腺肌肉及淋巴细胞的功能，T2毒素中毒后的一般临床症状为厌食、呕吐、腹泻、生长停滞、繁殖和神经机能障碍等。使用T2毒素试剂盒则能够快速而准确的分析样品中T2毒素残留。
本试剂盒采用一步竞争ELISA方法检测玉米、大米、豆类、花生、燕麦、饲料等样本中的T2毒素，试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，酶标板微孔条上预包被T2毒素抗原与样本中T2毒素竞争抗T2毒素抗体(抗体工作液)，同时抗T2毒素抗体与酶标二抗（酶标记物）相结合，经TMB底物显色，样本吸光值与其含有的T2毒素成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中T2毒素的含量。
二、试剂盒组成
酶标板……………………………96孔 
浓缩标准液（黑盖）：各1ml
0ppb、2ppb、6ppb、18ppb、54ppb、162ppb
酶标记物…………………6ml
抗体工作液………………6ml
底物液A（白盖）……………………6ml
底物液B（黑盖）……………………6ml
终止液（黄盖）………………………6ml
10X浓缩洗涤液（白盖）……………40ml
说明书………………………………1份
盖板膜………………………………1份
自封袋………………………………1份
三、技术指标
2.1 试剂盒灵敏度：0.2ppb(ng/ml)
2.2 反应模式：25℃，30min～15min
2.3 检测下限：
花生、玉米、燕麦、大豆、饲料等……………24ppb
小麦………………………………………………20ppb
 2.5 样本回收率：
花生、玉米、燕麦、大豆、饲料等……………110±15%
小麦………………………………………………110±15%
四、样本前处理
4.1 样本处理前须知：
实验器具必须洁净并使用一次性吸头，以避免污染干扰实验结果。
4.2 配液：
配液1：样品提取液
用去离子水将甲醇按3∶2体积比进行稀释（例：30ml甲醇+20ml去离子水）。
4.3.1 花生、玉米、燕麦、大豆、饲料等样品处理方法
1）取1g粉碎样品，加入20ml样品提取液；
2）剧烈振荡5min；
3）用定量分析滤纸过滤；
4）用蒸馏水或去离子水按1∶5比例稀释；
5）取50μl进行分析。
稀释倍数：120         检测下限：24ppb
4.3.2 小麦样品处理方法
1）取1g粉碎样品，加入20ml样品提取液；
2）剧烈振荡5min；
3）用定量分析滤纸过滤；
4）取上清液1ml，加入2ml二氯/甲烷，振荡，4000r/min，离心5min，取二氯/甲烷层，于50℃氮气吹干；
5）加入5ml10%甲醇，振荡混匀；
6）取50μl进行分析。
稀释倍数：100             检测下限：20ppb
五、需要的器材和试剂
5.1 仪器：酶标仪、打印机、均质器 、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）、漏斗、滤纸
5.2 微量移液器：单道20µl-200µl，100µl-1000µl、多道300µl
5.3 试剂：甲醇、二氯/甲烷 、去离子水
六、贮藏及保存期
储藏条件：试剂盒于2-8℃保存，避免冷冻。
保 质 期：该产品有效期为1年，生产日期见包装盒。
七、注意事项
7.1 室温低于25℃或试剂及样本没有回到室温（25℃）会导致所有标准的OD值偏低。
7.2 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
7.3 混合要均匀，洗板要彻底，在ELISA分析中的再现性，很大程度上取决于洗板的一致性。
7.4 在所有孵育过程中，用盖板膜封住微孔板，避免光线照射。
7.5 不要使用过了有效期的试剂盒，不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
7.6 显色液若有任何颜色表明变质，应当弃之。0标准的吸光度值小于0.5个单位（A450nm< 0.5 ）时，表示试剂可能变质。
7.7 反应终止液有腐蚀性，避免接触皮肤。