- ￥1390
- XKbio
- XK-P9541
- 国产/进口
- 2025年07月29日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
20
- 英文名：
Column Stool RNAOUT
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50次
英文名称：Column Stool RNAOUT
产品及特点：由于粪便中有机质含量丰富，对 RT-PCR 等后续反应有极大的抑制作用， 所以从粪便中提取高纯度的 RNA 一直是十分棘手的问题。本产品是在本公司因粪便 RNAout基础上开发的柱式粪便 RNA 提取产品，它具有下列特点：
1. 操作比非柱式法更加简单快速，处理一个样品只需要约十几分钟。
2. 去污染效果好，RNA 纯度更高，平均 OD260/280 一般都在 2.0 左右。
3. 得到的 RNA 可直接用于 RT-PCR、Northern 杂交、cDNA 合成等实验。
4. 性价比高于进口的柱式粪便 RNA 提取产品。
5. 试剂无毒无害, 环保。
6.本产品仅供产品。
规格及成分：
| 成 份 | 大纸盒包装 |
| 柱式粪便 RNAout 溶液 A | 50 mL |
| 柱式粪便 RNAout 溶液 B | 15 mL（棕） |
| 柱式粪便 RNAout 溶液 C | 50 mL |
| 离心吸附柱 | 50 套 |
| 通用洗柱液 | 50 mL |
| RNA 洗脱液 | 10 mL |
| 使用手册 | 1 份 |
自备试剂：氯仿。
使用方法：
1. 称取 0.5-1 g 粪便放入到含液氮的研钵中，迅速将冻成固体的粪便研磨成 粉末后。
2. 将粉末转移到 5-15mL 的塑料离心管中（不能使用玻璃离心管），加入 1 mL 65℃预热的溶液 A，立即剧烈振荡 20 秒，充分混匀。
3. 将匀浆物转移至干净的 1.5mL 塑料离心管中。
4. 在离心管中加入 0.3 mL 的溶液 B（溶液 B 用前需要摇匀，呈浑浊状）和 0.2 mL 自备氯仿，在振荡器上振荡 30 秒混匀，此时溶液呈均匀的乳浊 状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
5. 室温 13000 g 离心 3 分钟，两相间将有约 5-10 毫米厚的细胞破碎物。
6. 将上清液(约 0.6 mL)转移到另一干净的 1.5 mL 塑料离心管中，下层有机 相和中间层含有 DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。最好留下 100 uL 上清液不取。
7. 加入等体积的溶液 C，充分颠倒混匀。如果有沉淀产生，千万不要去掉沉 淀，一定要把所有的混合物上柱。
8. 将一半的溶液（如果有沉淀，则先混匀）转移到离心吸附柱中，13000g 室温离心半分钟，弃穿透液。
9. 将剩下的一半溶液（如果有沉淀，则先混匀）转移到同一离心吸附柱中， 13000g 室温离心半分钟，弃穿透液。
10. 加 0.7 mL 通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。再加 0.3 mL 通用 洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。
11. 室温离心半分钟。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响 RNA 的使用。
12. 将离心吸附柱转移到 RNase-free 收集管中，加入 50-100 uL RNA 洗脱 液，室温放置 1-2 分钟。
13. 13000g 室温离心半分钟，离心管中溶液即为 RNA 样品，可以立即使用 或存放于-80℃待用。
14. RNA 完整性的电泳检测：由于粪便 RNA 含有肠道上皮细胞和肠道细菌的 RNA，它们的分子量大小不一，所以电泳时不会形成清晰的条带。
15. RNA产量产率测定：通过OD260的光吸收可以得出RNA浓度（1 OD260 的 RNA=40 μg/mL），进而计算出 RNA 的产量（浓度×体积)和产率(RNA 产量/粪便的用量)。
16. RNA 纯度测定：无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 1.8-2.1 之 间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分 别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响 RT-PCR 等反应。
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文献和实验粪便污染指示菌（faeces pollution index bacteria）
水体中的病原微生物常因数量较少而难以检出，即使检出结果为阴性，也不能保证无病原微生物存在；同时检出手续也很复杂。所以，在实际工作中常借用检查水体中有无“指示菌”存在及其数量多少来判定水质是否被污染。这在水的卫生学检查方面有较重要的意义。一般将大肠菌群、粪链球菌、产气荚膜杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌等作为粪便污染指示菌，其中以大肠菌群指数（亦称大肠杆菌指数）最常使用。大肠菌群指数（coli-index）指1升水中含有的大肠菌群数。大肠菌群是一群以大肠埃希氏菌为主的需氧
食物经消化道通过机械性消化和化学性消化使食物分解成为结构简单的小分子物质，被小肠、大肠吸收进入血液和淋巴循环，从而为机体新陈代谢提供必不可少的物质和能量来源。未被吸收的食物残渣、消化道的分泌物、无机盐、水、粘液、肠道脱落细胞和细菌等形成粪便（feces, stool），通过直肠由肛门排出体外。健康人粪便的主要成分包括：①少量未被完全消化、吸收的食物残渣，如肌肉纤维、植物细胞、淀粉颗粒、食糜等。②消化道脱落的肠上皮细胞及肠道常驻细菌。③消化道分泌物，如粘液、酶类、粪胆原
1、粪便颜色 正常颜色：成人呈黄褐色，婴儿为黄色或金黄色。 临床意义：柏油色，见于上消化道出血等。红色，见于痢疾、结肠癌、痔出血等。陶土色，见了各种原因所致阻塞性黄疽等。绿色，见于婴儿消化不良等。黄绿色，见于伪膜性肠炎等。 2、粪便形态 正常形态：成形软便。 临床意义：粥样或水样稀便，见于急性胃肠炎、食物中毒、伪膜性肠炎等。粘液性或脓血性便，见于痢疾、溃疡性结肠炎、大肠炎、小肠炎、结肠癌、直肠癌等。凝乳块便，见于婴儿乳汁消化不良等。细条状便，见于
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