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- 详细信息
- 文献和实验
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- 供应商:
上海盛祺兆
- 规格:
50个/箱
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文献和实验为1 mm2 x 0.1 mm=1.0 x 10-4 ml。使用时,计数每个大正方形内之细胞数目,乘以稀释倍数,再乘以104,即为每ml 中之细胞数目。 1.3. 存活测试之步骤为dye exclusion,利用染料会渗入死细胞中而呈色,而活细胞因细胞膜完整,染料无法渗入而不会呈色。一般使用蓝色之trypan blue染料,如果细胞不易吸收trypan blue,则用红色之Erythrosin bluish。 2. 材料: 0.4 % w/v trypan blue
液。 2.用D-PBS 洗涤细胞一至二次。 3.加入trypsin-EDTA 溶液(1ml/25cm2, 2ml/75cm2),37 ℃ 作用数分钟,于倒立显微镜下观察,当细胞将要分离而呈现圆粒状时,吸掉trypsin-EDTA 溶 液。(若不移去trypsin-EDTA,则在 trypsin-EDTA trypsin作用后,加入适量含血清 之新鲜培养基终止作用,离心后再吸掉上清液。 4.轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量之新鲜培养基,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶
(0.05% trypsin-0.53mM EDTA-4Na, GibcoBRL 25300-062):以10 ml 分装于15 ml 无菌离心管中,保存于–20℃,使用前放在37℃ 水槽回温。 2.3. 新鲜培养基 2.4. 无菌吸管/离心管/培养瓶 3. 步骤: 3.1. 附着型胞(adherent cell) 3.1.1. 吸掉旧培养液 3.1.2. 用D-PBS 洗涤细胞一至二次 3.1.3. 加入trypsin-EDTA 溶液(1ml/25cm2, 2ml/75cm2),37
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