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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海盛祺兆
- 规格:
25000个/箱
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文献和实验循环的产物作为下一循环的模板。因此,在第二轮循环中通过变性产生的4条DNA单链结合引物并延伸(如图1-1),在第三轮及更多的循环中重复进行变性、退火、延伸这三步反应。如此循环20次,原始DNA将扩增约106倍,而循环30次后将达109倍。而所有上述过程将在1~2小时内完成。经过扩增后的DNA产物大多为介于引物与原始DNA相结合的位点之间的片断,而在反应前几轮循环产生的超过引物结合位点的较长链的DNA的比例将随着循环的不断地进行稀释到可以忽略的程度。第二节 PCR反应体系PCR的基本反应体系包括需要
节 材料、设备及试剂 一、材料 不同来源的模板DNA。 二、设备 移液器及吸头,硅烷化的PCR小管,DNA扩增仪(PE公司),琼脂糖凝胶电泳所需设备(电泳槽及电泳仪),台式高速离心机。 三、试剂: 1、10×PCR反应缓冲液:500mmol/L KCl, 100mmol/L Tris·Cl, 在25℃下, pH9.0, 1.0% Triton X-100。 2、MgCl2 :25mmol/L。 3、4种dNTP混合物:每种2.5mmol/L。 4、Taq DNA聚合酶5U/μl。
后定向克隆到载体中。 第二节材料、设备及试剂 一、材料 不同来源的模板DNA。 二、设备 移液器及吸头,硅烷化的PCR 小管,DNA 扩增仪(PE 公司),琼脂糖凝胶电泳所需设备(电泳槽及电泳仪),台式高速离心机。 三、试剂: 1、10×PCR 反应缓冲液:500mmol/L KCl, 100mmol/L Tris?Cl, 在25℃下, pH9.0, 1.0% TritonX-100。 2、MgCl2 :25mmol/L
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