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- 西格
- XG-X3733
- 国产
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海西格
- 库存：
42
- 英文名：
Walker/LLC-WRC 256
- 生长状态：
贴壁生长
- 物种来源：
大鼠
- 规格：
1×106cells/T25培养瓶
细胞系操作步骤如下：
1、剪切组织：先将所取得的组织，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手术镊去除黏附的结缔组织等非培养所需组织。再次清洗后，用手术刀将组织切成若干小块，移入青霉素小瓶或小烧杯中，加入适量缓冲液，用弯头眼科剪，反复剪切组织，直到组织成糊状，约1mm3大小。静置片刻后，用吸管吸去上层液体，加入适当的缓冲液再清洗一次。
2、消化分离：消化分离的目的是将细小的组织块消化分离成细胞团或分散的单个细胞，以利于进一步的培养，常用的消化酶有胰蛋白酶和胶原酶。
3、培养：细胞悬液用计数板进行细胞计数。用培养液将细胞数调整为（2～5）×105 cells／ml，或实验所需密度，分装于培养瓶中，使细胞悬液的量以覆盖后略高于培养瓶底部为宜。置CO2培养箱内，5％CO2，37℃静置培养。一般3～5d，原代培养细胞可以黏附于瓶壁，并伸展开始生长，可补加原培养液量1／2的新培养液，继续培养2～3d后换液，一般7～14d可以长满瓶壁，进行传代。
细胞收货
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
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文献和实验PNAS | 空间分辨代谢组学方法揭示“下游代谢物与上游代谢酶关联”的癌症相关代谢变化
的细胞保护剂来改善癌症治疗。根据一些研究者的说法，基于组胺的治疗能促进癌细胞中 DNA 损伤、凋亡和衰老并可以显著增加患癌动物的存活率。在本研究中，组氨酸和组胺呈现完全相反的空间分布。根据 256 例食管癌组织样本的成像数据，组氨酸在癌组织中显著上调而组胺显著下调。组胺与组氨酸的离子强度差异如图3B7所示。通过计算组胺与组氨酸的离子强度比，对HDC介导的组氨酸脱羧反应进行了研究(图3B6)，发现肿瘤组织的脱羧率相对于肌肉和上皮组织较弱。和基于强度比的质谱成像预测的一致，肿瘤组织的 HDC 表达
1、灰度 灰度（grey level）指图像各种分颜色的深浅程度。比较高级的图像分析仪可将灰度分成为256级，也有的只能将灰度分成64级，总之都是2n ,24是26 256是28 。免疫细胞化学标本上反应产物的染色深浅即可用灰度来表示。能将一张标本上不同染色深度区分为几十或更多的等级，这是人眼所不及的。因此，某些实验的结果，如果用光学显微镜作一般的观察，似乎实验组与对照组无明显差异，而用图像灰度法经统计学分析，则可反映出显著性差异，说明仅仅用显微镜观察是不够
基本术语和常用测量参数 （一）像素与灰度 1．像素 是构成显示器图像的最基本单元，按行和列(X和Y)方向排列成矩列。任何一矩列均对应一个点，这些点称为像素。单位面积屏幕上像素愈多则图像愈清晰，即分辨率愈高，显示的图像也越细腻和真实。数字图像的像素越多，灰度量化等级也越多，图像分析仪分析出的结果越准确。但是。当像素达到一定量时，由于图像分析仪计算机的存储量和计算量呈几何级数增大，从而减慢了计算机的处理速度。 2．灰度 系指图像每一像素的明暗(深浅)程度
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