Beta-TC-6小鼠胰岛素瘤胰岛Beta细胞

细胞培养最初认识:　
什么是细胞培养？ 细胞培养是指将细胞从动物或植物体内取出，然后在适宜的人工环境中生长的过程。细胞可以在培养前直接从组织中取出并通过酶或机械方法进行解离，也可以来源于已建立的细胞系或细胞株。
细胞系
第一次传代培养后，原代培养物即被称为细胞系。来自于原代培养的细胞系寿命有限（即：有限细胞系），随着细胞的传代，生长能力最强的细胞会占据优势，最终导致细胞群体在基因型和表型上达到一定程度的均一性。
细胞株
如果通过克隆或其他方法从培养物中阳性筛选出了细胞系的亚群，则该细胞系成为一个细胞株。与亲代细胞系起始时相比，细胞株通常会获得一些其他的遗传学改变。
冷冻保存:
如果传代时有多余的细胞，则可使用适当的保护剂（例如DMSO或甘油）处理细胞， 并在-130°C以下的温度下保存（冷冻保存），直至使用。记住，并不是非要-180℃。

细胞培养的应用:
细胞培养是细胞和分子生物学所使用的一项重要技术，为细胞正常生理和生化研究 （如代谢研究、衰老研究）、药物和毒性化合物对细胞的作用、以及致突变性和致癌性研究提供了上佳的模型系统。
细胞培养还可用于药物筛选和开发，以及生物化合物（如疫苗、治疗性蛋白质）的大规模生产。在这些应用中，使用细胞培养的一大优势在于，使用来源于同一克隆的一批细胞可获得稳定一致、可重复的结果。这也许是细胞培养的最主要应用场景。
细胞系操作步骤如下：
1、剪切组织：先将所取得的组织，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手术镊去除黏附的结缔组织等非培养所需组织。再次清洗后，用手术刀将组织切成若干小块，移入青霉素小瓶或小烧杯中，加入适量缓冲液，用弯头眼科剪，反复剪切组织，直到组织成糊状，约1mm3大小。静置片刻后，用吸管吸去上层液体，加入适当的缓冲液再清洗一次。
2、消化分离：消化分离的目的是将细小的组织块消化分离成细胞团或分散的单个细胞，以利于进一步的培养，常用的消化酶有胰蛋白酶和胶原酶。
3、培养：细胞悬液用计数板进行细胞计数。用培养液将细胞数调整为（2～5）×105 cells／ml，或实验所需密度，分装于培养瓶中，使细胞悬液的量以覆盖后略高于培养瓶底部为宜。置CO2培养箱内，5％CO2，37℃静置培养。一般3～5d，原代培养细胞可以黏附于瓶壁，并伸展开始生长，可补加原培养液量1／2的新培养液，继续培养2～3d后换液，一般7～14d可以长满瓶壁，进行传代。
注意事项：
（1）无菌操作：细菌或霉菌污染是培养失败的常见原因，必须加强各个环节的无菌操作观念，以预防为主，一旦污染，一般很难消除。
（2）培养液：所用的培养液必须满足细胞生存和生长的必要条件。由于细胞来源的动物种类、组织类型不同，对培养液的要求有一定的差异，必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。
（3）胎牛血清：胎牛血清对于维持培养细胞的生存和促进细胞增殖起着关键性作用。可选择多种不同批号的胎牛血清进行小样分析。一旦确定某一厂家的某一批号胎牛血清后，就保持应用至实验完成。
（4）胶原酶溶液：必须新鲜配制，贮存时间过长(即使是-20℃低温保存)，也将影响消化效力，导致消化时间过长，细胞损伤增加。
（5）L-谷氨酰胺：几乎所有细胞对谷氨酰胺都有较高的要求，细胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白质，在缺少谷氨酰胺时，细胞会因生长不良而死亡。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，加有谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱贮存两周以上时，就应重新加入原来量的谷氨酰胺。
（6）静置培养：原代细胞在消化分离后，置于CO2培养箱的头24～48h (必要时72h)内，应处于绝对静置状态，切忌不时地取出培养瓶观察生长状况，这将使原代分离细胞难以贴壁，更谈不上伸展和增殖，初学者尤应注意。不必担心培养液中的营养成分会消耗光，在细胞增殖之前对营养的要求并不大。原代培养初期仅加一薄层培养液的目的也在于有利于细胞贴壁伸展。
（7）消化时间：一般消化至肉眼尚可见微小组织颗粒即可，因为此时组织颗粒已经松散，略经吹打即成细胞团或单个细胞，过久的消化往往导致细胞损伤加重，细胞培养成活率降低。
（8）其他生长因子：经过以上处理，一般原代分离细胞培养均可以成功。对于少数特殊类型细胞也可以考虑加一些特殊的生长因子，如胰岛素能促使细胞摄取葡萄糖和氨基酸。另外，内毒素、EGF、FGF等均有促有丝分裂作用，但费用较高。
公司正在 销售的产品：
MAGEA4 Antibody (Clone#OTI2C1)　　GA ELISA Kit
RPS6KB2 Antibody (Clone#19R00)　　βOHB ELISA Kit
STAT3 Antibody　　Irna ELISA Kit
CD21/CR2 Antibody (Clone#2C5)　　IFN-α ELISA Kit
HLCS Antibody (Clone#OTI1E4)　　IL-10 ELISA Kit
USP28 Antibody　　PSA ELISA Kit
NMNAT1 Antibody (Clone#OTI1F7)　　hs-CRP ELISA Kit
CDC42 Antibody　　FⅡ ELISA Kit
SNRPA1 Antibody (Clone#26S89)　　bFGF ELISA Kit
DTL Antibody　　PPAR-γ ELISA Kit
CD42b/GP1BA Antibody　　HSP-90 ELISA Kit
Talin Antibody (Clone#8d4)　　hs-CRP ELISA Kit
CACNB1 Antibody (Clone#OTI3H6)　　SOD ELISA Kit
HSF1 Antibody (Clone#21H50)　　Histone Acetyltransferase,HAT ELISA Kit
HSC70/HSPA8 Antibody　　major histocompatibility complex Ⅲ,MHCⅢ/HLA-Ⅲ ELISA Kit
BCHE Antibody　　Tumor Necrosis Factor γ,TNFγ ELISA Kit
MLH1 Antibody (Clone#OTI1B9)　　Adipose Triglyceride Lipase,ATGL ELISA kit
IFITM3 Antibody　　early prostate cancer antigen 2,EPCA2 ELISA kit
SCP2 Antibody (Clone#28S05)　　Helicobacter pylori IgG ，Hp-IgG ELISA Kit
PD-L2/CD273/PDCD1LG2 Antibody (Clone#OTI10G2)　　heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1,hnRNP A1 ELISA Kit
KMT5A Antibody (Clone#OTI3G9)　　amiodarone,AD ELISA Kit
ZFP42 Antibody (Clone#OTI3H9)　　islet amyloid polypeptide,IAPP ELISA Kit
TMPRSS5 Antibody (Clone#OTI4A11)　　platelet factor 3， PF3 ELISA Kit