在生理条件下实时检测细胞行为
xCELLigence RTCA 仪器采用基于阻抗的技术,可在数秒至数天内于标准 CO2 细胞培养箱中连续自动检测细胞的健康和行为。只需将细胞加至 E-Plate,即可开始实时监测细胞数量、细胞增殖速率、细胞大小、细胞形态以及细胞-基质粘附强度。
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Agilent
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细胞阻抗分析的功能单元是一组嵌入微孔板底面的微金电极。当浸入导电溶液(如缓冲液或标准组织培养基)中时,在这些电极间施加电压会使电子离开负极、流经细胞或培养基,然后回到正极形成完整电回路。
xCELLigence RTCA 仪器采用基于阻抗的技术,可在数秒至数天内于标准 CO2 细胞培养箱中连续自动检测细胞的健康和行为。只需将细胞加至 E-Plate,即可开始实时监测细胞数量、细胞增殖速率、细胞大小、细胞形态以及细胞-基质粘附强度。
这种高灵敏度实时细胞阻抗分析采用融合在 E-Plate 底面的微金电极,可非侵入性地检测细胞特性。电极与溶液交界处存在的贴壁细胞会阻碍电子流动。阻抗的强弱取决于细胞数量、大小、形状以及细胞-基质的粘附强度。微金电极表面以及所采用的电势 (22 mV) 均不会对细胞活力和细胞行为产生影响。
xCELLigence RTCA 工作流程可帮助用户获得高灵敏度、高重现性的定量分析数据,同时大大减少手动处理时间。只需将细胞加至 E-Plate 孔板中,即可开始实时检测细胞数量、细胞增殖速率、细胞大小、细胞形态以及细胞-基质粘附强度。使用细胞指数 (Cell Index) 这一无单位参数来报告贴壁细胞引起的细胞电流阻抗。

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文献和实验中至少一种 Z 因子分值超出0.5,表明检测可靠性高(参见表 2)。相反,两种配体混合的原代肾上皮细胞(RMEC) Z 因子接近 0.25,表明检测可靠性不显著。但后续 GPCR 筛查检测结果表明,该细胞类型其他 GPCRs 可靠性更高。 图 1:GPCR 检测可靠性评价。 HeLa 细胞接种密度是 10000 细胞每孔,接种于E-Plate 96 上,放置于xCELLigence RTCA MP 仪器,并在培养箱中过夜。然后去除生长培养基,添加检测缓冲液,持续细胞监测 15
xCELLigence系统实时监测低毒性X-tremeGENE DNA转染
本研究中,在Hela细胞上进行了X-tremeGENE 9和X-tremeGENE HPTransfection Reagent的细胞毒性和转染效率检测,并与其他试剂进行了比较。 步骤 · 细胞毒性使用xCELLigence RTCA MP仪器进行检测,通过测定电阻抗,可长时间、无标记、动态监控细胞生理活动,包括细胞黏附、伸展、增殖、死亡以及其他形态变化。新推出的配套耗材E-plate VIEW 96每个孔下部有0.5mm透明的窗口,可完成可视化的精微检查。 · 罗氏
孔中加入配制好的梯度药物并继续进行实时动态检测, 即可获得化合物介导的细胞效应曲线及不同时间段IC50值。 四、实验结果实例 典型的利用RTCA技术获得的细胞增殖实验检测结果: 利用RTCA技术获得的典型的细胞毒性实验检测结果: 五、与传统方法(MTT)对比优势 1、实验操作简单,步骤少,人为误差小。 2、采用无标记方法,不存在标记效率问题,并且对细胞无损伤,细胞在最接近生理状态下进行检测,结果准确度高。 3、实验结果客观,重复性好,不需设置重复孔(实验
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