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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海西格
- 库存:
46
- 英文名:
小鼠脐带血间充质干细胞
- 物种来源:
小鼠
- 规格:
5×105
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 小鼠脐带血间充质干细胞 | 5×105 | XG-X5212 |
小鼠脐带血间充质干细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
在技术部标准操作流程下,建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
使用方法
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
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文献和实验一、细胞复苏和接种 1. 37℃预热小鼠间充质干细胞培养液和基础培养液。 2. 从液氮中取出细胞产品管,快速将其置入37℃水浴中解冻,直到管中只剩下最后一片结晶(注意:不要让水没过产品管)。 3. 在生物安全柜中,用75%的酒精擦拭产品管外壁。 4. 将产品管中的细胞移至15ml无菌离心管中,慢慢逐滴加入预温的37℃基础培养液4-5 ml混匀,边滴加边摇匀。 5. 用1ml基础培养液冲洗产品管,并将其转移到15 ml离心管中,边滴加边摇匀。 6. 轻轻混匀
沉淀。 5、开封后的 ECS 试剂有沉淀出现是否可以继续使用? 答:沉淀物如果是结晶状,建议 56 度水浴摇晃混匀。如果结晶消失,则可以继续使用,少量沉淀不影响提取效果。 6、试剂提取试剂盒加溶液 B后无豆花状固体,此时是否可以继续实验? 答:不可以,必须明确在看到豆花状沉淀,溶液变透明后才可进行下一步操作。此时需要继续加入溶液B,并在37度水浴加热,溶液看到豆花状沉淀。 7、如何选择血浆和脐带血样本进行外泌体研究? 答:血清和脐带血都是常见的外泌体样本来源。由于血液在高压过程中会受到剧烈
细胞,如巨噬细胞、单核细胞、中性粒细胞和树突状细胞。 虽然移植的细胞在体内大部分都已解体,但它们的细胞残余可以通过血液运输到身体的其他部位,并在那里它们被吞噬。移植细胞的清除使吞噬细胞向抗炎、耐受性和再生表型极化,事实上,这些清除死亡细胞的重编程吞噬细胞可以在全身迁移,直接或通过改变免疫抑制或抗原呈递机制来调节适应性免疫系统的细胞,从而进一步介导组织修复和疾病部位的再生。例如,静脉输注的小鼠骨髓间充质干细胞可以通过极化内源性巨噬细胞产生抗炎细胞因子白细胞介素 - 10 (IL-10) 来减轻小鼠的败血
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