人踝或膝滑成纤维细胞

二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
在技术部标准操作流程下，建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
使用方法
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          

3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
公司正在 销售的产品：
ase ELISA Kit  CD336/NCR2 Antibody (Clone#27N49)
E-Selectin/CD62E ELISA Kit  GNE Antibody (Clone#29G96)
FS ELISA Kit  MMP1 Antibody
MC ELISA Kit  Alpha Actinin/ACTN1 Antibody (Clone#OTI7A4)
IL-23 ELISA Kit  U2AF65/U2AF2 Antibody (Clone#3G9)
TRAb ELISA Kit  Ki67/MKI67 Antibody (Clone#5E12)
GP-MM ELISA Kit  PSAP Antibody (Clone#24P28)
HD ELISA Kit  BTN3A2 Antibody (Clone#OTI1A6)
C3a ELISA Kit  BMX Antibody (Clone#1C6)
C4a ELISA Kit  BCL2 Antibody (Clone#OTI2E5)
DPPⅣ ELISA Kit  UBXN2B Antibody (Clone#OTI2E8)
LTC4 ELISA Kit  DAPP1 Antibody (Clone#OTI7A3)
Amylin ELISA Kit  ZNF365 Antibody (Clone#OTI8G7)
aGT ELISA Kit  LRCH4 Antibody (Clone#OTI1F8)
Ang-Ⅰ ELISA Kit  PAX2 Antibody
Cyt-C ELISA Kit  GNAQ Antibody (Clone#13H4)
HIF-1α ELISA Kit  IL1 Antibody (Clone#8C13)
B7-2/sCD86 ELISA Kit  Cytohesin 2/CYTH2 Antibody (Clone#OTI4D9)
CH50 ELISA Kit  PGD Antibody (Clone#OTI2A5)
HSP ELISA Kit  SMAP2 Antibody (Clone#OTI9B6)
SOD ELISA Kit  CARS Antibody (Clone#26C60)
人踝或膝滑成纤维细胞MDA ELISA Kit  PKC Eta/PRKCH Antibody
Hsp-60 ELISA Kit  PON3 Antibody (Clone#OTI1A5)
CETP ELISA Kit  Dermcidin/DCD Antibody (Clone#OTI3F5)
α1-AGP ELISA Kit  SLC22A17 Antibody (Clone#OTI2D6)
Hpt/HP ELISA Kit  FATE1 Antibody (Clone#OTI5E2)
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通；由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。