人骨微血管内皮细胞

二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
在技术部标准操作流程下，建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
使用方法
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          

3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
公司正在 销售的产品：
C3 ELISA Kit  ZNF397 Antibody (Clone#OTI1F3)
MPO-ANCA ELISA Kit  TAX1BP3 Antibody
CC16 ELISA Kit  RKIP/PEBP1 Antibody
SP-A ELISA Kit  MRE11 Antibody
CIAP ELISA Kit  UBE2D4 Antibody (Clone#OTI1B1)
i-PTH ELISA Kit  PARP1 Antibody
AECA ELISA Kit  RBAP48/RBBP4 Antibody
ANX-Ⅴ ELISA Kit  ZNF79 Antibody (Clone#OTI3D2)
Renin ELISA Kit  MSH2 Antibody (Clone#6B4F7)
C4 ELISA Kit  RORB Antibody (Clone#OTI4B12)
Lptn/LTN/XCL1 ELISA Kit  CD22 Antibody (Clone#5E7)
Gzms-A ELISA Kit  PFKFB4 Antibody (Clone#OTI1C8)
Gzms-B ELISA Kit  UFD1L/UFD1 Antibody (Clone#29U95)
MPO ELISA Kit  PARVB Antibody (Clone#OTI1B9)
GMP-140 ELISA Kit  HMGN2 Antibody (Clone#25H24)
SDF-1a/CXCL12 ELISA Kit  Clusterin/CLU Antibody
IFI16/p16 ELISA Kit  Cytokeratin 4/KRT4 Antibody
NGB ELISA Kit  GGPS1 Antibody (Clone#OTI3F9)
LHRH ELISA Kit  YWHAZ Antibody (Clone#6G5)
GR ELISA Kit  TPRKB Antibody (Clone#OTI3H3)
NT-proBNP ELISA Kit  Progranulin/GRN Antibody (Clone#OTI4B9)
histon-H2b ELISA Kit  C12orf26/METTL25 Antibody (Clone#OTI2B6)
ON ELISA Kit  GBA3 Antibody (Clone#OTI3E8)
FFA ELISA Kit  Calpain 1/CAPN1 Antibody (Clone#2E3)
人骨微血管内皮细胞TAFI ELISA Kit  Raptor/RPTOR Antibody
NF-κB ELISA Kit  PFAAP5/N4BP2L2 Antibody (Clone#OTI1E2)
OLAb ELISA Kit  RAB17 Antibody (Clone#OTI5E2)
ADAM8 ELISA Kit  BAG2 Antibody (Clone#8F11G2)
FE ELISA Kit  PSMA5 Antibody (Clone#426CT32.1.2)
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通；由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。