人胰腺癌相关成纤维细胞

人胰腺癌相关成纤维细胞

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  • ¥7750
  • 西格
  • XG-X4566
  • 国产
  • 2025年07月15日
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      上海西格

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      27

    • 英文名

      人胰腺癌相关成纤维细胞

    • 物种来源

    • 规格

      5×105

    人胰腺癌相关成纤维细胞
    一、细胞基本属性
    产品名称 规格 货号
    人胰腺癌相关成纤维细胞 5×105 XG-X4566

    人胰腺癌相关成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
    人胰腺癌相关成纤维细胞
    二、细胞培养状态
    发货时发送细胞电子版照片
    在技术部标准操作流程下,建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
    使用方法
    1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
    2. 贴壁细胞消化
    1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
    3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          
    人胰腺癌相关成纤维细胞
    3. 细胞收货脱落
    1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
    3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
    5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
    4. 细胞实验
    因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
    四、注意事项
    1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
    2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
    3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
    4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。 
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