人肝癌细胞

二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
在技术部标准操作流程下，建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
使用方法
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          

3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
公司正在 销售的产品：
CALLA ELISA Kit  Flotillin 2/FLOT2 Antibody (Clone#4D8A3)
Ag-NORs ELISA Kit  SIL1 Antibody (Clone#OTI1F9)
BRCA-1 ELISA Kit  Human p53 Antibody Unconjugated Conjugated, Flow Validated (Clone#PAB122)
ITF ELISA Kit  SNAP23 Antibody
8-OHdG ELISA Kit  OPTN Antibody (Clone#3D8)
sp185/HER-2 ELISA Kit  C17orf58 Antibody (Clone#OTI6E9)
TP ELISA Kit  RAB9A Antibody
TS ELISA Kit  IRS2 Antibody (Clone#18I18)
BRAK/CXCL14 ELISA Kit  AHNAK Purified Antibody (Clone#EM-09)
CTACK/CCL27 ELISA Kit  CXCL5 Antibody (Clone#25C20)
ENG/sCD105 ELISA Kit  Histone H2B/H2BC21 (formyl K120) Antibody (Clone#27H06)
IL-2R ELISA Kit  OSGEP Antibody (Clone#OTI9E3)
HSF-1 ELISA Kit  Alpha A Crystallin/CRYAA Antibody (Clone#10B9)
FGF-23 ELISA Kit  Annexin A3/ANXA3 Antibody (Clone#OTI1A9)
LFA-1/CD11a+CD18 ELISA Kit  Fibulin 2/FBLN2 Antibody (Clone#7H4F6/3B9A11)
Eotaxin ELISA Kit  GRIA2/GRIA3 Antibody
ANG-ⅠR ELISA Kit  HLA-DRB1 Antibody
ATⅡR1 ELISA Kit  MYADM Antibody (Clone#MYADM/972)
IL1Ra ELISA Kit  GALT Antibody (Clone#29G81)
MMP11 ELISA Kit  UBOX5 Antibody (Clone#OTI1C5)
FoxO4 ELISA Kit  SYTL4 Antibody (Clone#OTI2B3)
FoxO2 ELISA Kit  Histone H3 (mutated K27 Met) Antibody (Clone#26H46)
FoxO1 ELISA Kit  QKI Antibody (Clone#26Q56)
FoxO3 ELISA Kit  TRPV5 Antibody (Clone#27T91)
ANG-4 ELISA Kit  PAX6 Antibody
人肝癌细胞Integrin ELISA Kit  KCTD14 Antibody (Clone#OTI1D11)
CCR1 ELISA Kit  Emmprin/CD147/BSG Antibody (Clone#7H5E7)

四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通；由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。