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- 酶联免疫检测实验
- 上海
- 2026年03月24日
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伊莱博生物科技（上海）有限公司
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分子实验技术服务
酶联免疫检测实验是伊莱博生物的基础服务项目之一。酶联免疫吸附剂测定法，简称酶联免疫法，或者ELISA法。它的中心就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测。
实验原理：
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。
②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅来进行定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。
ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂：
①固相的抗原或抗体
②酶标记的抗原或抗体
③酶作用的底物（显色剂）。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。
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文献和实验基于细胞的酶联免疫检测实验（Cell Based Elisa）可以： （1）检测高通量的样本，定量细胞膜上或细胞内的蛋白质的表达情况。 （2）用于磷酸化蛋白质的检测，易降解蛋白质的检测，少量细胞目的蛋白质的检测。 试验方法原理 先将细胞种于 96 孔板中，对细胞进行不同条件的处理。待检测目的蛋白时，对细胞进行多聚甲醛的固定、灭活、打孔及封闭非特异性结合位点。根据抗原抗体反应的原理，一抗孵育与目的蛋白质结合，加入酶标记二抗与一抗结合，加入底物显色后酶标
计算机断层成像技术（CT，Computed Tomography）作为一种无损成像技术，借助于 X 射线显微光学和 X 射线断层重构技术，可以在无创伤情况下提供被扫描对象的内部结构图像，其在临床医学上的应用是 20 世纪以来医疗技术进步的重要标志之一。而小动物模型在生物医学研究中有极为重要的地位，小动物、尤其是小型啮齿动物，已经成为生物和医学研究实验室用来建立人类疾病模型或者测试新药和治疗方法的动物选择。CT 技术在小动物成像中的应用，提供了小动物全身层面进行活体生物检测的有效
。 d) 取处理后的样品液，用微量进样器吸取适量样品液，将样品液缓缓加入凝胶板内地凹口部位(样品点入处)。注意不要冲散样品。 e)用二根导线连接电泳槽与电泳仪，注意红色与黑色电极的插头和插口相配。接通电源。控制电压在浓缩胶中为70—80V，这次实验我们控制在75V，走过浓缩胶后电压调为120V。电泳时观察凝胶板上的样品溴酚蓝的色条带走至近底端1cm 时，停止电泳。关闭电源。然后从电泳槽内小心取出凝胶板。 2) 染色 a) 用刀片或薄板将凝胶板外的两块玻璃板轻轻撬开，使凝胶倾
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