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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海西格
- 库存:
28
- 英文名:
兔脐静脉内皮细胞
- 生长状态:
贴壁
- 细胞形态:
内皮细胞样
- 物种来源:
兔
- 组织来源:
脐带组织
- 规格:
5×105
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 兔脐静脉内皮细胞 | 5×105 | XG-X5455 |
| 组织来源 | 脐带组织 |
| 种属来源 | 兔 |
| 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
| 细胞简介 | 兔脐静脉内皮细胞分离自脐带组织;它是脐静脉的重要结构组成细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构,脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉,卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。在子宫中,子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管,与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近,在此处母体和胎儿的血液间进行CO2和O2,代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿产生的废物运送至胎盘,脐静脉将O2和营养物质从胎盘运送给胎儿。 |
| 包被条件 | PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%) |
| 培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
| 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
| 生长特性 | 贴壁 |
| 细胞形态 | 内皮细胞样 |
| 传代特性 | 可传5代左右;3代以内状态最佳 |
| 传代比例 | 1:02 |
| 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% |
质量检测:实验室分离的兔脐静脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
兔脐静脉内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
兔脐静脉内皮细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈内皮细胞样,在技术部标准操作流程下,细胞可传5代左右;3代以内状态最佳;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
使用方法
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
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四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
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文献和实验正常人脐静脉原代内皮细胞培养一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplem e nt2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 ) + 1% P/S4、染色液: 0.4% Trypan Blue5、消化液: PriCells Isolation of Primary Cell Kit6、检测试剂:抗人
,有可能会与某些实验设置之间存在冲突。在这种情况下,我们推荐使用不含 VEGF 的内皮细胞生长培养基。该培养基专门针对人类原代细胞进行优化,但也可用于牛、猪、小鼠、兔、象、狗和大鼠的大血管内皮细胞以及各种内皮细胞系。● 细胞分离试剂盒romoCell 细胞分离试剂盒的开发是为了用于温和和有效地分离培养中附着的人类原代细胞。每一产品批次均使用人类原代细胞进行检测。该试剂盒包括以下三种成分:1. HepesBSS (30 mM Hepes)2. 胰蛋白酶/EDTA溶液(0.04 % / 0.03
准备的药品:pbs,199培养液,I型胶原酶(SIGMA)。主要的器械:手术剪,镊子,止血钳,丝线,鞘管(PTCA用的动脉鞘的扩张管,6F或7F)。首先,以PBS漂洗脐带1-2次,用剪刀将脐带剪成数段15CM左右长短(本人认为这个长度较为合适)。之后,以止血钳提起一段脐带的一端,将鞘管插入脐静脉中,并经该鞘向静脉内注入PBS10-8ml左右(最后注入空气吹净残留液体),后以丝线将另一端结扎(一定要扎紧),并从鞘管注入适量胶原酶,一般1ml(0.1%)足以,并以止血钳将该端钳闭。后将如此处理
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