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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海西格
- 库存:
50
- 英文名:
小鼠肺巨噬细胞
- 生长状态:
贴壁
- 细胞形态:
巨噬细胞样
- 物种来源:
小鼠
- 组织来源:
肺泡组织
- 规格:
5×105
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 小鼠肺巨噬细胞 | 5×105 | XG-X4977 |
| 组织来源 | 肺泡组织 |
| 种属来源 | 小鼠 |
| 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
| 细胞简介 | 小鼠肺巨噬细胞分离自肺泡组织;肺巨噬细胞来源于骨髓生成的单核细胞向肺内的迁移,无论在生理状态或炎症时,这都是肺内口噬细胞的主要来源。生理情况下,单核细胞向肺内迁移时,首先停留附着于肺血管内壁,再逐步迁移进入肺间质、肺泡腔及小气道,也有部分进入胸膜腔。巨噬细胞功能及其在疾病发生过程中的作用是目前研究的热点问题之一。肺巨噬细胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活跃,有重要防御功能。肺泡是重要的巨噬细胞储存器官 , 为结核病的研究提供了重要的材料。 |
| 包被条件 | |
| 培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
| 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
| 生长特性 | 贴壁 |
| 细胞形态 | 巨噬细胞样 |
| 传代特性 | 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群 |
| 传代比例 | |
| 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% |
质量检测:实验室分离的小鼠肺巨噬细胞经CD68免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
小鼠肺巨噬细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
小鼠肺巨噬细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈巨噬细胞样,在技术部标准操作流程下,细胞属于终末分化细胞;属于不增殖细胞。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
使用方法
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
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