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EMSA的分类
验证型EMSA
用于验证探针是否含有可与蛋白质结合的位点。探针与纯化蛋白混合孵育,探针与蛋白结合与否,可以直接表明探针和蛋白的互做关系。
竞争型EMSA
与探针序列相同,不含修饰基团的DNA片段称为冷探针。在探针与蛋白质混合液中加入大量冷探针,冷探针含有和探针相同的DNA序列,会干扰探针与蛋白的结合。在电泳图的相应位置处,电泳带的的信号减弱或消失。
超迁移EMSA
超迁移EMSA利用到了与待检测的目的蛋白特异性结合的抗体。在实验体系中引入特异性抗体,用抗体特异性地结合蛋白-探针复合物,这就是超迁移EMSA。蛋白-探针复合物被抗体识别并结合,该三聚复合物在凝胶电泳中,迁移速率再次增大,电泳带出现在蛋白-探针复合物的上方。
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