手机验证
询价列表
暂时没有已询价产品
微信扫一扫分享
分享到新浪微博
分享到丁香园论坛
柱式动物组织/细胞总蛋白抽提试
企业认证
点击 QQ 联系
12个月
李记生物Life-iLab
常温保存
100T
产品描述本试剂盒创新性地采用过柱纯化的方法,能够快速、温和、高效地裂解动物组织或细胞,有效提取总蛋白,包括离心管柱和经过优化的细胞裂解液。与传统的 RIPA 裂解液相比,本试剂盒可以提取出更多的蛋白,避免在细胞裂解过程中由于 DNA 沉淀和不溶性细胞碎片导致的部分蛋白丢失。采用过柱纯化技术,最小可处理 20 μL 样本与裂解液混合物,最大可达 500 μL。提供变性和非变性两种细胞裂解液,用户可根据后续的实验需求选取不同的裂解液。【注】:变性裂解液可用于 SDS-PAGE,Western-blotting, ELISA 分析;非变性裂解液可用于 IP,Co-IP,enzymeassays 等分析。订购信息
产品组分
运输与保存常温运输。常温保存,有效期12个月。【注】:研磨棒可重复使用。使用方法细胞样品一、 样品裂解变性液提取1. 去除细胞培养液,用预冷的PBS 洗涤两次。按照6孔板每孔加入150-200uL 的裂解液的比例均匀加入裂解液,如果细胞密度过高可增加裂解液的量至250-300uL。【注】:裂解液过少会使细胞裂解不充分,影响蛋白提取的质量。2. 用枪吹打数下,转移裂解液至离心管柱中。【注】:少量没有裂解的细胞不影响最终蛋白提取的质量。3. 14,000 rpm 离心1 min。4. 收集离心管底的裂解液即为细胞全蛋白提取液。【注】:细胞裂解液中不含蛋白酶抑制剂,需要用户加入蛋白酶抑制剂防止蛋白降解。非变性液提取1. 去除细胞培养液,用预冷的 PBS 洗涤两次。按照6孔板每孔加入150-200uL 的裂解液的比例均匀加入裂解液,如果细胞密度过高可增加裂解液的量至250-300uL。【注】:裂解液过少会使细胞裂解不充分,影响蛋白提取的质量。2. 用枪吹打数下,冰上放置10min后转移裂解液至离心管柱中。3. 14,000 rpm 离心1 min。4. 收集离心管底的裂解液即为细胞全蛋白提取液。【注】:细胞裂解液中不含蛋白酶抑制剂,需要用户加入蛋白酶抑制剂防止蛋白降解。二、悬浮细胞变性液提取1. 收集细胞0.5~2×107于1.5mL离心管中,1mL预冷的PBS洗涤两次,1,000xg 离心3min,弃上清,重复三次。2. 根据细胞沉淀体积加入同体积的预冷PBS重悬细胞后,根据细胞量加入对应量的变性裂解液。【注】:表中为推荐用量;PBS不可多加,只要能使细胞重悬即可。
3. 剧烈震荡15s后,转移裂解液于离心管柱中。【注】:少量没有裂解的细胞不影响最终蛋白提取的质量。4. 14,000 rpm 离心1min(如果裂解液过于粘稠可增加离心时间)。5. 收集离心管底的裂解液即为细胞全蛋白提取液。【注】:细胞裂解液中不含蛋白酶抑制剂,需要用户加入蛋白酶抑制剂防止蛋白降解。非变性液提取1. 收集细胞0.5~2×107于1.5mL离心管中,1mL预冷的PBS洗涤两次,1,000xg 离心3min,弃上清,重复三次。2. 根据细胞量加入对应量的非变性裂解液。【注】:表中为推荐用量。细胞沉淀体积(uL) 加入裂解液体积(uL)
3. 剧烈震荡15s后,冰上孵育10min。4. 转移裂解液于离心管柱中。5. 14,000 rpm 离心1min6. 收集离心管底的裂解液即为细胞全蛋白提取液。【注】:细胞裂解液中不含蛋白酶抑制剂,需要用户加入蛋白酶抑制剂防止蛋白降解。3、组织样品变性液提取1. 把组织剪切成小碎片。2. 加入适当裂解液,一般100mg 组织加入1mL 裂解液。【注】:如果裂解不充分可适当增加裂解液。3. 用研磨棒在1.5mL离心管中研磨组织或者用玻璃匀浆器,直至充分裂解。【注】:如果是心肌,皮肤等不易研磨的组织应使用匀浆器匀浆。4. 转移裂解液于离心管柱中。5. 14,000 rmp 离心1min(如果裂解液过于粘稠可增加离心时间)。6. 收集离心管底的裂解液即为全蛋白提取液。【注】:如果组织样品非常小,可剪切后直接加入裂解液并剧烈vortex裂解。非变性液提取1. 组织剪切成小碎片。2. 加入适当裂解液,一般100mg 组织加入1ml 裂解液。【注】:如果裂解不充分可适当增加裂解液。3. 用研磨棒研磨组织匀浆器匀浆,直至充分裂解。冰上放置10min。【注】:如果是心肌,皮肤等不易研磨的组织应使用匀浆器匀浆。4. 转移裂解液于离心管柱中。5. 14,000 rmp 离心1min。6. 收集离心管底的裂解液即为全蛋白提取液。【注】:如果组织样品非常小,可剪切后直接加入裂解液并剧烈vortex裂解。注意事项1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。2. 本产品不含蛋白酶抑制剂,使用中应加入 蛋白酶抑制剂混合物(100×, 不含EDTA)(货号: AP02L084) 防止蛋白降解。3. 本产品不兼容Bradford法测蛋白浓度,请使用 BCA蛋白定量试剂盒(货号: AP12L025)。
本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
资料下载:
AP01L204-柱式动物组织细胞总蛋白抽提试剂盒.pdf 附件下载 (下载 0 次)
请 [登录] 后再下载!
需要更多技术资料 索取更多技术资料
AP01L204-柱式动物组织细胞总蛋白抽提试剂盒.pdf 附 (下载 0 次)
马上登录 或注册,即可保存询价历史