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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 检测范围:
-
- 检测方法:
Sandwich-ELISA/双抗体夹心ELISA
- 样本:
Serum, Plasma, Other biological fluids/血清、血浆等其它生物样品
- 适应物种:
Mouse/小鼠
- 供应商:
上海科敏生物科技有限公司
- 规格:
96T
英文名称/English Name:Mouse CAD (Caspase Activated Dnase) ELISA Kit
货号/Catalog Number:E-EL-M0245
种属/Organism:Mouse/小鼠
指标名称/Other Names:CAD
检测方法/Method:Sandwich-ELISA/双抗体夹心ELISA
检测范围/Detection Range:-
灵敏度/Sensitivit:
检测样品/Sample Type:Serum, Plasma, Other biological fluids/血清、血浆等其它生物样品
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠CAD抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的CAD会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠CAD抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠CAD抗体与结合在包被抗体上的小鼠胱天蛋白酶激活的DNA酶(CAD)酶联免疫吸附测定试剂盒小鼠胱天蛋白酶激活的DNA酶(CAD)酶联免疫吸附测定试剂盒结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠胱天蛋白酶激活的DNA酶(CAD)酶联免疫吸附测定试剂盒浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本中小鼠胱天蛋白酶激活的DNA酶(CAD)酶联免疫吸附测定试剂盒的浓度。
标本收集:
血清:全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
血浆:
抗凝剂推荐使用EDTA,标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂标本。其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃/-80℃电冰箱内,避免反复冻融,6个月内进行检测,4℃保存的应在1周内进行检测。 如果样本中检测物浓度高于标准品最高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做预实验,以确定稀释倍数)。
试验所需自备物品:
酶标仪(450nm波长滤光片)高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL37℃恒温箱, 双蒸水或去离子水
关键词:小鼠胱天蛋白酶激活的DNA酶(CAD)Elisa试剂盒,人Elisa试剂盒,小鼠elisa试剂盒,大鼠elisa试剂盒
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文献和实验性,从而避免了RNA 酶的降解作用;相分离过程均在低温、近中性溶液中进行,减少了理化因素对RNA 分子造成的损伤,从而保证了RNA 分子的完整性。 四、操作过程 在总RNA 和基因组DNA 同步纯化过程中要注意防止RNA 的降解。迅速抑制或灭活内源性RNA 酶,避免外源性RNA 酶污染,抑制理化因素对RNA 的降解,是提取完整RNA 分子的重要前提。 1. 样品收集 样品在分离后短时间内,细胞内的RNA 酶即被释放、激活,或者RNA 去保护暴露酶作用位点,导致大部分RNA 降解。建议收集新鲜的样品
。 4)在抑制剂ICAD的作用下,脱氧核糖核酸酶不会损伤胞核内DNA。Gz-B可水解ICAD,由此激活caspase活化的脱氧核糖核酸酶(CAD),直接活化DFF40/CAD(DNAfragmentation 40/caspase-activateddeoxynuclease),导致DNA损伤和细胞死亡。 颗粒酶B介导的靶细胞杀伤机制 Apaf-1转接蛋白酶活化因子l DFF40/CAD:DNA片段化酶40/caspase活化的脱氧核酸酶;End。G:内源
的酶、优化酶浓度和孵育时间,大部分组织都常用酶解法。 (3)组合法:即机械解离+酶解,使组织均匀充分地接触酶消化液,减少了强机械力和过长酶消化时间对细胞造成的伤害。有商品化的经过验证的解离试剂盒可以选择,搭配全自动组织解离仪,做到高效而稳定地组织解离。 5. 如何解离肿瘤组织? 由于肿瘤组织异质性高细胞类型多(肿瘤细胞、成纤维细胞、免疫细胞、内皮细胞等)、细胞间连接紧密细胞外基质异常沉积、结构和微环境复杂、异常代谢等问题,肿瘤组织的解离较为困难。样本的选取需要合适,并且也要根据不同的肿瘤组织特
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