Anti-Mouse CD3 FITC (100 μg)

用 CD3/CD28 做好 T 细胞激活与扩增

分别利用 CD3 与 CD28 的功能学抗体，以及 CD3/CD28 Streptamer® 激活扩增 T 细胞的实验步骤与实验结果。 CD3/CD28抗体法 1、实验步骤： 1.1 抗体包被 用无菌 PBS 将 anti-mouse CD3 抗体（克隆号：145-2C11）稀释至 5μg/ml，稀释后的抗体加入到 24 孔板中，每孔 400μl，4°C 包被过夜。（注：板子在加入抗体之前，先用无菌 PBS 润洗 2-3 遍，避免干孔）； 1.2 小鼠脾脏淋巴细胞分离（次日） 1. 将 70μm

用全血直接分选 CD3+ T 细胞

上 Strep-tag 的 Fab 片段（Fab-Streps）特异性的结合到琼脂糖基质上。随后，加入全血或其他血液制剂流过柱子。目的细胞通过特异性的 Fab-Strep 作用从而结合到琼脂糖基质上，其他非目的细胞则有效的被洗去。最后，加入生物素使目的细胞从 Fab-Streps 上解离。至此，就已分离得到不带任何标记的、真实的目的细胞可用于下游的实验研究。   1. 实验流程 所需产品： CD3 Fab-TACS® Gravity Kit, human（IBA Lifesciences, Cat

荧光素FITC标记抗体的方法

min。②荧光素的准备 根据欲标记的蛋白质总量，按每毫克免疫球蛋白加0．01mg荧光色素，用分析天平准确称取所需的异硫氰酸荧光素粉末。也可用下述公式计算出免疫球蛋白、荧光素的量，还可以算出需加缓冲液的量。a．蛋白溶液：含量Amg／m1；容积Bml。b．总蛋白量(AXB)＝Crag。c．C／20～C／10＝Dmg(如蛋白含量低于20mg／ml，用C／10；如高于20mg／ml，用C／20)。d．荧光素FITC的量：(1／50～2／100)XC＝Emg。e．巳0．5mol／L(pH9．5)碳酸盐缓冲