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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 克隆性:
G4.18
- 标记物:
FITC
- 规格:
500 ug
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文献和实验分钟收集细胞; 5. 将上一步离心得到的细胞沉淀,重悬至扩增培养基中,并进行计数。 1.3 细胞刺激(次日) 扩增培养基成分:RPMI1640 + 10% 血清 + 5ug/ml anti-mouse CD28(克隆号:37.51) + 双抗 1. 将细胞浓度调整至 1-2×10^6/ml(本次实验为 2×10^6/ml,该浓度偏大); 2. 从 4°C 冰箱取出前一天包被的板子,弃掉包被液,无菌PBS洗涤3遍; 3. 每孔加入 500μl 细胞悬液,放置于 37°C 含 5% CO2 细胞
。 ④其他试剂和材料 l%叠氮化钠、离心机及离心管、烧杯(25m1)、搅拌器、无菌吸管及毛细滴管、烧杯(500m1)透析袋等。 (2)方法及步骤 ①取高效价的抗人球蛋白兔免疫血清,分离球蛋白,用盐水(0.15mol/LNaCl)及缓冲液(0.5mol/LNaHC03—Na2C03,pH9.0)稀释使每毫升内含蛋白质lOmg,缓冲液为总量的10%,降温至4℃。 ②加入异硫氰酸盐(FITC)荧光素[蛋白:荧光素=(50—80)mg‘lmg],在0~4~C下电磁搅拌12~
and the supernatant discarded) twice with Solution A (1.2 M sorbitol, 50 mM KPO4, pH 7). To spheroplast, cells are resupended in 500 ul of Solution A containing 0.1 b-mercaptoethanol, 0.02 glusulase and 5ug/ml zymolyase. The suspension is incubated at 37oC
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