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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
充足
- 英文名:
Free Cholesterol Assay Kit
- 保质期:
6个月
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
2-8℃保存
- 规格:
100T
作用原理是FC氧化酶可催化FC生成4-胆甾烯酮和H2O2,过氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成红色醌类化合物,其在500 nm有吸收峰,颜色深浅与FC含量成正比。作用方式如下:
测定总胆固醇(TC)请选择60723ES 总胆固醇(TC)含量检测试剂盒;测定游离胆固醇(FC)请选择60724ES 游离胆固醇(FC)含量检测试剂盒。
产品信息
| 货号 | 60724ES60 |
| 规格 | 100 T |
组分信息
| 组分编号 | 组分名称 | 规格 | 储存条件 |
| 60724-A | 工作液 | 20 mL | 2~8℃ |
| 60724-B | 标准品 | 10 mg | 2~8℃ |
储存条件
2~8℃保存,有效期6个月。
使用说明
【注意事项】实验之前建议选择3个预期差异大的样本做预实验,如果样本吸光值不在测量范围内,建议稀释或者增加样本量进行检测。
- 需自备的仪器和溶剂:
- 溶液的配制:
2)标准品溶液的配置:10 mg胆固醇使用前加入517 μL提取液,振荡溶解后即为50 μmol/mL的胆固醇标准溶液,2~8℃可保存4周。
3)标准溶液的稀释:取50 μmol/mL胆固醇标准液20 μL ,加入480 μL异丙醇,充分混匀,配制成2 μmol/mL的标准液。注意2 μmol/mL标准液最好现配现用,实验中每管需10 μL,但为减小实验误差,故配制体积偏大。
3. 操作步骤
1)样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
a. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约0.1 g组织,加入1 mL提取液)进行冰浴匀浆。8000 g,4℃离心10 min,取上清置冰上待测。
b. 细菌/细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1 mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300 w,超声2秒,间隔3秒,总时间3 min);然后 8000 g,4℃离心10 min, 取上清置于冰上待测。
c. 血清(浆)等液体样本:直接测定,若有沉淀请离心后取上清待测。
2)测定步骤
a. 可见分光光度计/酶标仪预热30 min以上,调节波长至500 nm,分光光度计蒸馏水调零。
b. 按需取出一定量的工作液,37℃水浴预热30 min。
c. 在1.5 mL EP管/96孔板按下表步骤加样
| 试剂名称(µL) | 测定管 | 标准管 | 空白管 |
| 异丙醇 | 10 | - | - |
| 标准液 | - | 10 | - |
| 待测上清 | - | - | 10 |
| 工作液 | 190 | 190 | 190 |
| 充分混匀,室温静置15 min,反应完成后测定500 nm处吸光值A,分别记为A测定、A标准和A空白,ΔA测定=A测定-A空白,ΔA标准=A标准-A空白。空白管和标准管只需测1-2个。注:若样本为血清,则空白管中的提取液(异丙醇)需要更换为蒸馏水进行实验。 | |||
- 总胆固醇含量计算
FC含量(μmol/dL)=C标准液×(A测定-A空白)÷(A标准-A空白)×100=200×(A测定-A空白)÷(A标准-A空白)
b. 组织或细胞、细菌中 FC 含量计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:FC含量(μmol/mg prot)=C标准液×(A测定-A空白)÷(A标准-A 空白)×V样总÷(Cpr×V样总)=2×(A测定-A空白)÷(A标准-A空白)÷Cpr
(2)按样本质量计算:FC 含量(μmol/g 质量)=C 标准液×(A测定-A空白)÷(A标准-A空白)×V样总÷W=2×(A测定-A空白)÷(A标准-A空白)÷W
(3)按细胞/细菌数量计算:FC 含量(μmol/104 cell)=C 标准液×(A测定-A空白)÷(A标准-A空白)×V样总÷N=(A测定-A 空白)÷(A标准-A空白)
C 标准液:标准液的浓度,2 μmol/mL;V 样总:加入提取液的体积,1 mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;100:单位换算系数,1 dL=100 mL;500:细菌或细胞数量,500万;N:细胞数量,以万计。
4. 实验实例:
取 0.1 g 大鼠肝脏加入 1 mL 提取液进行匀浆研磨,取上清后按照测定步骤操作,使用 96孔板测得A空白=0.046、A标准=0.354、A测定=0.127,按样本质量计算含量得:
FC含量(μmol/g 质量)=2×(A测定-A空白)÷(A标准-A空白)÷W =5.320 μmol/g 质量。
注意事项
- 如果样本吸光值大于1.2,建议将样本用提取液稀释后进行测定。
- 提取液中含有使蛋白变形的成分,故按蛋白浓度计算时需要重新提取蛋白进行测定。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 本产品仅作科研用途!
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文献和实验三句话读懂一篇 CNS:有氧运动真的能抗癌!| 吃蜂蜜竟还可以降低血糖和胆固醇?
或可降低血糖和胆固醇水平 蜂蜜中的糖含量大约为 80%,且为游离糖。过去研究表明,过多摄入游离糖,会增加肥胖和 2 型糖尿病风险。 2022 年 11 月 16 日,加拿大多伦多大学 Tauseef A Khan 团队在 Nutrition Reviews 杂志发表研究论文 Effect of honey on cardiometabolic risk factors:a systematic review and meta-analysis。 该研究是迄今为止最全面的临床试验回顾
因各种抗体而异,称为可变区,分别用 VH 和 VL 表示。两者构成抗体的抗原结合部位,只与相应的抗原决定簇匹配,发生特异性结合,是抗体专一性结合抗原的结构基础。 IgG 可被木瓜蛋白酶分解为三个区段,其中两个相同的区段称抗原结合片段(Fab)。每个 Fab 都保存结合抗原的能力,但只有一个抗原结合位点,是单价的,与抗原结合后不出现凝集或沉淀。另一区段称 Fc 段,无抗体活性,但具有 IgG 特有的抗原性。 IgG 可被胃蛋白酶分解为两个片段,一个 Fab 双体,称F(ab')2,能和两个相同的抗原结合
)。这类测定方法是目前临床广泛使用的方法,快速并较为准确。⒋遮蔽直接测定法利用脂蛋白中某种特异抗体等物质,先将血浆中LDL和VLDL包裹保护,不受测定胆固醇试剂的影响,而直接测定未被包裹的HDL中的胆固醇,在不离心分离条件下,测定出HDL的胆固醇含量,快速准确,是近年来发展的新技术,值得推广应用。二、血清总脂质测定血清总脂质主要包括FC、CE、PL和TG等。血清总胆质测定除作为脂质代谢紊乱及有关疾患的协助诊断外,还可用于血总脂增加的原发性胆汁酸肝硬化、肾病综合征或急慢性肝炎以及血总脂减少的重症
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