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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 库存:
231
- 样本:
血清、血浆及相关液体样本
- 标记物:
详见操作说明
- 适应物种:
人、大鼠、小鼠、植物、动物等
- 应用:
仅供科研实验
- 检测方法:
双抗体夹心法
- 检测范围:
详见操作说明
- 规格:
96T/48T
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1980.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1580.0 |
小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)酶联免疫分析试剂盒
Mouse Alpha-fetoprotein,AFP ELISA KIT
产品优势
公司销售的所有产品均配有产品说明、技术资料。我们拥有稳定的科研队伍、先进的实验设备。将针对您的应用需求,为您提供专门的服务。高品质的ELISA试剂盒让您的实验结果更具科学性、准确性、专业性。将节省您大量的时间和精力更好地投入到实验工作中。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)表达。
将目标抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入微生物化的目标抗体,将未结合的生物素抗体洗净后,加入HRP标记和亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
试剂盒组成
| 1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
| 2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 阳性对照 | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 阴性对照 | 0.5ml×1瓶 |
| 4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
| 5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
| 6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
实验所需自备试验器材
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
试剂盒操作步骤
A.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
B.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
C.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
D.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
E.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
F.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
G.温育:操作同3。
H.洗涤:操作同5。
I.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
J.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
K.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)酶联免疫分析试剂盒仅供科研实验!
实验结果计算
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
实验时出现的问题描述及解决方案
问题描述:变异系数大
可能原因:加液不正确
相应对策:检查加液情况
问题描述:背景值高
可能原因:检测抗体的工作浓度
酶标版洗涤不完全
洗液有污染
相应对策:使用推荐的稀释倍数
重新阅读操作手册,保证清洗完全;如果用自动洗板机,请检查所有的出口是否有堵塞
配置新鲜的洗液
试剂盒性能:请向客服人员索要详细电子版说明书!
小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)酶联免疫分析试剂盒
产品保存温度:2-8℃
产品有效期:6个月
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文献和实验【摘要】研制CA125时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)试剂盒。方法 采用双抗体夹心法建立CA125TRFIA试剂盒,对试剂盒各项指标进行评价。结果 该试剂盒的工作范围为10~600U/mL,分析灵敏度为1.07U/mL,批内、批间的精密度分别为4.5%~8.1%,V6.9%~11.5%。与CEA、AFP、CA50、CA15-3、CA19-9无交叉反应。稳定性试验表明试剂可以在4℃稳定1年,37℃稳定7d。425份正常血清标本测试该试剂盒的正常参考值范围是0~37U/mL。123份血清
测定,有助于甲状腺髓样癌的诊断和复发的估计。 (二)甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP) 甲胎蛋白是1956年Bergstrandh和Czar在人胎儿血清中发现的一种专一性的甲种球蛋白。1963年G.I.Abelev首先发现AFP主要是由胎盘层其次是卵黄囊合成,胃肠道粘膜和肾脏合成较少。1964年Tatarinov发现肝细胞癌患者血清中检测到AFP.AFP是一种在电场中泳动于α-球蛋白区的单一多聚体肽链的糖蛋白,其分子量平均为70ku,含糖4%,AFP的编码基因位于4号
℃)由专人运送至指定点指定接收人。 4.6拒收标本:凡与41-45所述内容不符的标本,人员应向临床或就诊者说明拒收标本的原因,并提出解决的方案或建议。 5.分析系统 5.1分析仪器:为美国BIO-RAD公司提供的MODEL550型酶标仪,仪器校准请参见仪器操作规程。 5.2分析试剂:为上海飞龙试剂公司提供的配套的AFP试剂盒,规格为48test/盒,2-8℃贮存,有效期12个月;在效期内使用试剂。 5.3质控试剂:为上海飞龙试剂公司提供的配套的AFP试剂盒中所附的阴、阳性
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