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文献和实验下面的操作方法可以使约3~5分子的生物素与1分子的蛋白结合,对某些蛋白来说,生物素与蛋白的分子比可根据不同的生物素化要求进行调整。 1. 溶解2~10 mg 蛋白于1 ml 的BuphTm磷酸盐缓冲液中,并计算溶解的毫摩尔数。如果蛋白含有不恰当的缓冲液(如Tris或者甘氨酸),可以通过在PBS中透析或浓缩的方法除去。计算:蛋白质量(mg)/蛋白分子量(MW)=蛋白质的毫摩尔数。 2. 在打开之前,平衡生物素至室温。加2 mg Sulfo-NHS-Biotin于100 ul
使用一种不被自然利用的稀有金属,莱斯大学的化学家们发明了一种合成酶,有助于解开难以研究的数千种蛋白质的身份,其中包括许多在癌症和其他疾病发挥关键角色的蛋白质。这项研究最近在线发表在《美国化学学会杂志》上。 “我们已经将铑的化学性能和目前生物学已知能识别和选择的特定蛋白结合在一起,”共同研究作者Zachary Ball,莱斯大学化学助理教授说,“结果是一种工具,在许多方面,比任何单独使用生物或化学的方法更有效。” Ball三年前开始研究双铑催化剂。他一开始没有试图用它们们来合成酶,但他对一个
相关专题 蛋白表达技术全攻略 本指南介绍了大规模和小规模GST蛋白表达 和纯化的方法。由于蛋白的多样性,因此推荐先进小规模表达及纯化测试。 材料与试剂 1. IPTG (Sigma) 2. 咪唑 (Sigma) 3. 蛋白酶抑制剂 (Roche) 4. 溶菌酶(Sigma) 5. 谷胱甘肽 琼脂 糖 4B 珠 (Pierce 15160) 6. 谷胱
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