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文献和实验含还原剂(如Na2 S2 O5 等)量多时,会抵消氯胺T的作用,降低碘利用率,甚至导致标记完全失败。放射性碘源要用无载体的,标记所用全部用具和试剂必须不含碘;只要有极少量的碘的污染,非放射性碘就会稀释放射性碘,使放射性碘利用率显著降低。为了便于放射性防护和除污染,以及减少射线对蛋白质分子的损伤,标记投入的放射碘量不宜过大,一般以 (2)放射性碘与多肽、蛋白质用量的比例:这比例对标记结果的影响很大。如上述原因,一般标记时放射性投入量不宜过多,示踪实验室中常规每次只用1~2mCi
蛋白质、多肽的放射性核素(125I)的标记氯胺T法(ch-T法)
,新鲜配制,即配即用。 (3)偏重亚硫酸钠溶液:用0.05mol/L pH7.4 PB配制成2mg/ml,新鲜配制。 (4)KI溶液:用0.05mol/L pH7.4 PB配制成2mg/ml。 (5)待标记的蛋白质或多肽:用0.05mol/L pH7.4 PB配制成1mg/ml。 (6)Na125 I溶液(3.7GBq/ml) (7)分离柱和Sephadex G50凝胶 (8)0.05mol/LpH7.4 磷酸盐缓冲液(PBS) (9)放射性薄层扫描仪和活度
反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。点这里→ 阅读全文 免疫组化SABC法 SABC (Strept Avidin-Biotin Complex) 法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法,是众多免疫组织化学方法的一种。SABC法:一抗+ 生物素标记二抗+ 滴加试剂SABC(链霉卵白素+ 辣根酶标记生物素)+ 辣根
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