杆状病毒-昆虫蛋白表达服务

【专题讨论】杆状病毒——昆虫细胞蛋白表达系统，影响蛋白表达的因素？

不知道有多少人成功用杆状病毒——昆虫细胞表达系统成功进行过蛋白表达？我最近表达一段病毒的非结构蛋白nsp-6，构建的重组Bacmid质粒经PCR鉴定正确，可是进行表达时，却未见蛋白表达，同时进行的试剂盒对照（含CAT基因的重组细胞中则有较好的表达。 我听说约有70%的蛋白在原核表达系统中是不表达的，但不知道这样的情况会不会发生在我用的昆虫细胞表达系统，除了实验操作失误方面的原因，还有什么因素是不使蛋白表达的，请大家讨论一下。 下面是我的实验过程，请高手指教，同时希望也给新手一个指导

昆虫杆状病毒表达系统的研究进展

法和TK基因相比较略显繁琐，需经连续传代，但其不用改造辅助病毒，只需在转移载体中引入Neo基因即可。其它如 PCR、DNA斑点杂交及有限稀释法等，也可用于筛选重组病毒。以上方法各具特点。虽然有些新方法需一定的条件，但一旦建立起来后就可方便、迅速地得到重组病毒，为杆状病毒表达系统的普及应用创造了良好的条件 4、影响外源蛋白表达的因素 利用杆状病毒昆虫表达系统表达外源基因的理论基础，就是杆状病毒的基因表达与调控，但有关病毒晚期基因高表达和其调控机制目前还不十分清楚。利用多角体基因的启动子表达外源

【求助】凋亡抑制基因

ysh2006 我现在手上有一个携带杆状病毒一凋亡抑制基因（此基因属于凋亡抑制基因家族成员，其家族其它已发现的成员均在人肿瘤组织中有表达，并具有或多或少的临床意义，这是我们选择此基因的依据）的质粒，在昆虫细胞中证实此基因具有抑制凋亡的功能。我准备做如下实验：质粒扩增、转染入肺癌细胞株，验证其是否具有抑制肺癌细胞凋亡功能，如果有表达，则继续行动物实验验证，最后一步检测其在人肺癌标本中的蛋白表达及其与临床病理特征之间的关系。 问题：此病毒基因仅仅在昆虫