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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 库存:
145
- 样本:
血清、血浆及相关液体样本
- 标记物:
详见操作说明
- 适应物种:
人、大鼠、小鼠、植物、动物等
- 应用:
仅供科研实验
- 检测方法:
双抗体夹心法
- 检测范围:
详见操作说明
- 规格:
96T/48T
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1980.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1580.0 |
人类似RIKEN cDNA 4933429F08 基因 酶联免疫分析试剂盒
human similar to RIKEN cDNA 4933429F08 gene ELISA KIT
产品优势
公司销售的所有产品均配有产品说明、技术资料。我们拥有稳定的科研队伍、先进的实验设备。将针对您的应用需求,为您提供专门的服务。高品质的ELISA试剂盒让您的实验结果更具科学性、准确性、专业性。将节省您大量的时间和精力更好地投入到实验工作中。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人类似RIKEN cDNA 4933429F08 基因 表达。
将目标抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入微生物化的目标抗体,将未结合的生物素抗体洗净后,加入HRP标记和亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
试剂盒组成
| 1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
| 2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 阳性对照 | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 阴性对照 | 0.5ml×1瓶 |
| 4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
| 5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
| 6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
实验所需自备试验器材
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
试剂盒操作步骤
A.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
B.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
C.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
D.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
E.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
F.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
G.温育:操作同3。
H.洗涤:操作同5。
I.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
J.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
K.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人类似RIKEN cDNA 4933429F08 基因 酶联免疫分析试剂盒仅供科研实验!
实验结果计算
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
实验时出现的问题描述及解决方案
问题描述:变异系数大
可能原因:加液不正确
相应对策:检查加液情况
问题描述:背景值高
可能原因:检测抗体的工作浓度
酶标版洗涤不完全
洗液有污染
相应对策:使用推荐的稀释倍数
重新阅读操作手册,保证清洗完全;如果用自动洗板机,请检查所有的出口是否有堵塞
配置新鲜的洗液
试剂盒性能:请向客服人员索要详细电子版说明书!
人类似RIKEN cDNA 4933429F08 基因 酶联免疫分析试剂盒
产品保存温度:2-8℃
产品有效期:6个月
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文献和实验1.4. 2-△△CT方法的数据分析实时定量PCR所得到CT值可以很容易的输出到表格程序如Microsoft Excel中去。为了显示数据分析过程,我们在这里给出了一个基因表达定量的实验数据和样本列表。通过β-actin 均一化处理,我们对目标基因fos-glo-myc 的表达变化进行了监测。在8h 的时间范围内,在每一时间点都取3 个重复样本,每一样本在cDNA 合成之後都做定量PCR ,数据分析用到了公式9,即:Time x 表示任意时间点,Time 0表示经β -actin 校正
值,通过cDNA 浓度梯度的log值对△CT值作图,如果所得直线斜率绝对值接近于0,说明目标基因和内标基因的扩增效率相同,就可以通过△△CT方法进行相对定量。在图1中,直线斜率是0.047,因而假设成立,△△CT方法可以用来分析数据。如果两个扩增反应效率不同,则需要通过定量标准曲线和绝对定量的方法来进行相对定量;或者也可以重新设计引物,优化反应条件使得目标序列和内参序列具有相同的扩增效率。 1.3. 2-△△CT内标和参照因子的选择 使用内标基因的目的是为了对加入到反转录反应中的RNA 进行均一
技术下难以获得。 1 概述 当前人类基因组研究已进入一个重要时期,2000年将获得人类基因组的全部序列,这是基因组研究的转折点和关键时刻,意味着人类基因组的研究将全面进入信息提取和数据分析阶段,即生物信息学发挥重要作用的阶段。到1999年12月15日发布的第115版为止,GenBank中的DNA碱基数目已达46亿5千万,DNA序列数目达到535万;其中EST序列超过339万条; UniGene的数目已达到7万个;已有25个模式生物的完整基因组被测序完成,另外的70个模式生物基因
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