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T4 DNA连接酶(T4 DN
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T4 DNA ligase
24个月
武汉益普生物科技有限公司
-20 ±5 °C
40000U
注:平末端载体与 DNA 片段进行连接时,应先将载体进行去磷酸化处理,以防发生自连接现象。为提高连接效率,每 20 µL 反应体系中可以加 2 µL 50% PEG 4000。2. 16℃反应过夜。3.转化实验1)将连接产物加入到 100 µL 感受态细胞中(连接产物不应超过感受态细胞的 1/10),轻弹混匀,冰上孵育 30 min。2)将离心管于 42℃ , 热激 90 sec ,之后立刻置于冰水浴静置 2-3 min。3)向离心管中加入 900 µL LB 或 SOC 培养基,37℃ , 220 rpm ,振荡培养 1h。4)2500g 离心 5 min ,吸去 900 µL 上清,用剩余培养基重悬菌体,用无菌涂布棒将剩余菌体在正确抗性的平板上涂布均匀,待菌液被平板吸收后,37℃倒置培养过夜。
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