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线粒体苹果酸脱氢酶(MDHm)测试盒

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  • ¥227.50 - 422.50
  • 联祖
  • LZ-S01148
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  • 2025年07月12日
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      上海联祖

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      56

    • 检测方法

      微量法、紫外分光光度法

    • 规格

      100管/96样/50管/48样

    规格:100管/96样产品价格:¥422.5
    规格:50管/48样产品价格:¥227.5
    商品属性:
    产品名称 线粒体苹果酸脱氢酶(MDHm)测试盒
    规格  100管/96样  50管/48样 
    测试方法 微量法、紫外分光光度法
    货号 LZ-S01148

    商品介绍:
    测定意义
    MDH (EC 1.1.1.37)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一,催化苹果酸形成草酰乙酸;相反,胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物, 连接多条重要的代谢途径。因此,MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性,MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH,细菌中通常只含有NAD-MDH,在真核细胞中,NAD-MDH分布于细胞质和线粒体中。
    测定原理:
    MDHm催化NADH还原草酰乙酸生成苹果酸,导致340nm处光吸收下降。
    需自备的仪器和用品:
    紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。

    操作步骤(以组织样本为例):
    1、样本处理:称取1g组织于玻璃管中,加入1mL 6mol/L HCl,放入110℃烘箱中6~12h,离心机16000g 25℃离心20min,取上清液至新离心管中 ,然后加10mol/L NaOH调节pH至7.0。
    2、试剂准备:
    1)Substrate:加入8mL Substrate Diluent溶解。(现配现用)
    2)Dye Reagent:加入4mL Dye Reagent Diluent溶解。(现配现用)
    3)标准品:加入1mL蒸馏水溶解Standard得到Standard①;从Standard①取10μL加入990μL蒸馏水中得到Standard②;取200μL Standard②加入800μL蒸馏水中,制备得到浓度为200μmol/L的Standard。
    产品细节图片1

    产品细节图片2
    \商品介绍:
    测定意义
    MDH (EC 1.1.1.37)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一,催化苹果酸形成草酰乙酸;相反,胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物, 连接多条重要的代谢途径。因此,MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性,MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH, NADP-MDH主要存在于真核细胞中。
    测定原理:
    NADP-MDH催化NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸,导致340nm处光吸收下降。
    需自备的仪器和用品:
    紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

    产品细节图片3
    产品细节图片4

    注意事项:
    1.阳性对照H2O2一般使用浓度为100 μM (推荐浓度50-200 μM,具体依细胞类型而定) 。通常刺激后30 min-4 h可以观察到显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞,活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后30 min内观察不到活性氧的升高,可延长诱导时间或适当提高活性氧阳性对照的浓度。如果荧光信号过强,可缩短诱导时间或适当降低活性氧阳性对照的浓度。
    2.实验过程中,如果阴性对照细胞荧光也比较强,可以按照1:2000-1:5000 稀释荧光探针DCFH-DA,使DCFH-DA的终浓度为 2-5 μM。探针装载的时间可在15-60 min 内适当进行调整,尽量缩短读片时的曝光时间,并且试验组、对照组曝光时间需保持一致。
    活性氧阳性对照 (H2O2) 仅仅用于作为阳性对照的样品,并非所有试验组样品中都需加入活性氧阳性对照。
    3.探针装载后,一定要洗净未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。
    优势:
    1.提供了详细的样品制备和结果计算方法;
    2.提供标准品和标准曲线作参考;
    3.经过多种样本验证;动植物组织、细胞、血清、血浆,细菌等样本均已经过了验证,高度的兼容和匹配度,让您的样本充分发挥作用,不浪费。
    4.无放射性,安全稳定;无放射性试剂,其保质期长达一年以上,排除客观因素的干扰。
    5.操作便捷;步骤简单,2小时内完成检测。
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