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ATCC/DSMZ/ECACC
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人或动物
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常温或干冰
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| 种属 | 人 |
| 别称 | Caki-2 +GFP |
| 组织来源 | 肾脏 |
| 疾病 | 乳头状肾细胞癌 |
| 传代比例/细胞消化 | 1: 2传代 ,消化2-3分钟 |
| 完全培养基配置 | McCoy` s 5A培养基;10%胎牛血清;1%双抗 |
| 简介 | 该 细胞源自一位69岁白人男性的初期肾腺癌组织。 |
| 形态 | 上皮细胞样 |
| 生长特征 | 贴壁生长 |
| 倍增时间 | ~ 30 -40h |
| 抗原表达 | Blood Type A; Rh- |
| 致瘤性 | Yes, in nude mice; forms clear cell carcinoma. |
| STR | Amelogenin :X ,Y ;CSF1PO :10 ,12 ;D13S317 :10 ;D16S539 :9 ,13 ;D18S51 :17 ; D19S433 :13 ,14 ;D21S11 :27 ,31 ;D2S1338 :17 ,20 ;D3S1358 :14 ;D5S818 :11 ; D7S820 :12 ;D8S1179 :10 ;FGA :22 ;TH01 :6 ;TPOX :9 ,11 ;vWA :16 ,17 ; |
| 培养条件 | 气相 :空气 ,95% ;二氧化碳 , 5%。温度 :37摄氏度 ,培养箱湿度为70%-80%。 |
| 冻存条件 | 冻存液 :90% FBS ,DMSO 10%, 或使用非程序冻存液 :官网货号JY- H040 |
| 备注 | 该细胞通过慢病毒转染的方式携带GFP基因,若要求需要维持荧光强度 ,建议可以加入嘌呤 霉素进行再次筛选。 |
| 产品使用 | 仅限于科学研究 ,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
Note: If using a 12-well plate, add 250 μL of extraction solution to each well, incubate for 15-30 minutes on an orbital shaker. Transfer 100 µl of eluate from each well and create a duplicate by filling another set of wells
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文献和实验/Note: If using a 12-well plate, add 250 μL of extraction solution to each well, incubate for 15-30 minutes on an orbital shaker. Transfer 100 µl of eluate from each well and create a duplicate by filling another set of wells
在一起通过仪器,与单个细胞相比,测量高度不变,宽度和面积变为两倍,即出现 FSC-Height 不变,FSC-Area 和 Width 增大的现象,如图所示: 分析数据时,如果没有排除粘连体,就可能对结果的判断造成误导。举个例子: 如果样本中一部分细胞带有 GFP 绿色荧光,一部分细胞不带荧光,需要分选出带有 GFP 信号的细胞,细胞在缓冲液中的状态,可能会出现以下 5 种情况: 单细胞 粘连体 一个带 GFP 和一个不带 GFP 的细胞形成的粘连体(红框),在没有被排除的情况下,会被默
流式课堂 | 细胞带有 GFP 荧光时,如何进行流式凋亡分析?
随着生物研究进入基因时代,转染技术的应用越来越广泛。在此过程中,通常会引入 GFP(绿色荧光蛋白)标签,去验证转染是否成功。 在之前的流式课堂中,我们曾多次提到过流式配色问题。今天,就来带大家看看,带有 GFP 标签的细胞,在流式凋亡检测中,应该如何配色和分析结果。 一、如何选择试剂盒 挑选试剂盒时,需要选择干扰少的荧光组合。GFP 的激发/发射波长为 488/510,通常在流式细胞仪中的检测通道为 FL1。因此,我们不能选择荧光标签为FL1检测通道的凋亡检测试剂盒,如 AF488
Nanobiotechnology. 2020 Jan 9;18(1):10. 二、慢病毒介导 CD63-GFP 表达: 将外泌体的特定蛋白 CD63 和绿色荧光蛋白 GFP 的表达元件构建成质粒再包装到慢病毒中,随后用此慢病毒感染细胞,使细胞分泌的外泌体带有绿色荧光。 图6 用 GFP 标记的外泌体分别与 SH-SY5Y、BV2 和 DRG 细胞共培养 Artif Cells Nanomed Biotechnol. 2019 Dec;47(1):2918-2929. 图7 注射有 CD63-GFP 的外泌体后观察
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