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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 库存:
40
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 物种来源:
小鼠
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞名称:小鼠脉络膜血管内皮细胞
商品货号:YS-01X7397
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
原代细胞试用的实验类型:
原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验,如下:
一、细胞增殖检测:
常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验
公司正在出售的产品:
| 杂交瘤细胞株;3E5G7 | ras基因相关蛋白RAB37封闭多肽 |
| 杂交瘤细胞株;12H6G1 | 环指蛋白25封闭多肽 |
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| 蝙蝠肺细胞;Tb1Lu | 补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白7封闭多肽 |
| 人胃腺癌细胞;AGS | Ras蛋白特异鸟嘌呤核苷酸释放因子1封闭多肽 |
| 猫脑星形胶质细胞;PG-4(S+L-) | MYCBPAP封闭多肽 |
| 鼠胚成纤维细胞;SYF | 磷酸化FMS样酪氨酸激酶3 |
| 斑马鱼胚胎细胞;ZEM2S | 锌指蛋白30封闭多肽 |
| 人结肠癌细胞系;HCT116 | Endokinin-C封闭多肽 |
| 人外周血淋巴细胞;ARH-77 | T淋巴细胞凋亡相关蛋白TDAG51封闭多肽 |
| 人骨肉瘤细胞;U-2OS | 糖原蛋白1封闭多肽 |
| 人结直肠腺癌细胞;HCT-15 | HEG同源蛋白1封闭多肽 |
| 黑人Burkitt淋巴瘤细胞;Raji | 小鼠脉络膜血管内皮细胞ZCCHC18蛋白封闭多肽 |
| 小鼠神经母细胞瘤细胞;Neuro-2a[N2a;Neuro-2a] | KB抑制蛋白激酶β封闭多肽 |
| 小鼠逆转录病毒包装细胞;PT-67 | 亚甲基四氢叶酸脱氢酶1样蛋白封闭多肽 |
原代细胞培养方法及注意事项:
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤
掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色
偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。
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文献和实验摘要: 目的 探讨脑微血管内皮细胞的体外培养方法并进行细胞超微结构研究及组织型纤溶酶原激活物(TPA ) 活性测定。 方法 取新生小鼠脑组织, 通过匀浆、过筛、胶原酶消化、差速粘附等技术对鼠脑微血管内皮细胞进行原代培养, 待细胞铺满瓶底时, 用01125%胰酶20102%EDTA 消化, 离心收集内皮细胞, 进行传代培养。原代、传代各取8 例, 吸取培养液用酶联免疫吸附试验测试TPA 活性。 结果 经Ð 因子相关抗原免疫组织化学鉴定、细胞超微结构观察, 证明培养的是血管内皮细胞。培养
脑微血管内皮细胞是构成血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的重要成分,与外周血管内皮细胞不同,它具有高跨内皮阻抗(transendothelial electrical resistance,TER)、细胞间紧密连接、极少的胞饮小泡、缺乏窗孔结构以及含有选择性双向跨细胞膜转运系统等独有的特征,从而使血脑屏障形成一个限制大多数极性分子和蛋白质运动的选择性低渗透性的屏障[1]。由于体外培养的脑微血管内皮细胞保持了较多的其体内固有的特点[1],因此目前脑微血管内皮细胞
内皮细胞分布于整个循环系统,从心脏到最小的毛细血管。在这个步骤中,气管的活力很非常重要。取出器官和开始消化之间的时间越短将提高细胞更有活力的产出及不在含氧量低的条件下太久。小鼠的数量需要:小鼠应该是5~6周大小。年龄大的小鼠内皮细胞的产出会少些。最少5个小鼠可以得到很好的产出。 一、材料和试剂 1. 内皮细胞生长添加剂(ECGS)(Sigma,catalognumber:E2759) 2. 胶原酶I(Invitrogen,Catalognumber:17100-017
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