万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 库存:
28
- 生长状态:
贴壁
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
长梭形状,不规则细胞
- 物种来源:
兔
- 组织来源:
正常小肠组织
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
| 细胞名称 | 兔小肠平滑肌细胞 | 组织来源 | 正常小肠组织 |
| 商品货号 | YS-01X8131 | 种属来源 | 兔 |
| 包被条件 | 换液频率 | 每2-3天换液一次 | |
| 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 长梭形状,不规则细胞 |
| 传代特性 | 根据细胞特性 | 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养基 | 原代平滑肌细胞培养体系 | 培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% |
| 细胞简介 |
| 小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连。小肠与心互为表里。是食物消化吸收的主要场所,盘曲于腹腔内,上连胃幽门,下接盲肠,全长约5-6米,张开有半个篮球大,分为十二指肠、空肠和回肠三部分。其管壁由黏膜,黏膜下层,肌层和浆膜构成。 小肠平滑肌肉瘤是起源于小肠壁肌层、黏膜下肌层和肠壁血管平滑肌的恶性肿瘤,是小肠结缔组织恶性肿瘤中常见的一种。因此,体外小肠平滑肌细胞的培养对研究小肠平滑肌肉瘤提供了基础和前提。 |
质量检测:实验室分离的兔小肠平滑肌细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
兔小肠平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,兔小肠平滑肌细胞以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
兔小肠平滑肌细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈长梭形状,不规则细胞 ,在技术部标准操作流程下,细胞可传2-3代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,
37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度
的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内
加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验
器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL
(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
原代细胞培养方法及注意事项:
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。
公司正在出售的产品:
| 人类淋巴母细胞瘤细胞;HLCL4B9 | 感觉神经性耳聋常染色体隐性遗传61封闭多肽 |
| 人类淋巴母细胞瘤细胞;HLCL4F10 | 胰脂肪酶相关蛋白2封闭多肽 |
| 小鼠L细胞;TKMp97-12 | Rho的鸟嘌呤核苷酸交换因子12封闭多肽 |
| 小鼠淋巴瘤细胞;L-bFGF-5 | 子宫内膜封闭多肽 |
| 小鼠杂交瘤细胞;HBL20 | 细胞死亡防卫蛋白1封闭多肽 |
| 人类淋巴母细胞瘤细胞;HLCL14C1 | T淋巴细胞分化蛋白MAL2封闭多肽 |
| 小鼠杂交瘤细胞;HB(Balb/cXNS1)PaF4IVE8 | 14号染色体开放阅框35封闭多肽 |
| 人类粒细胞系;HumanCellline1D3 | 酮基移换酶样蛋白1封闭多肽 |
| 人类淋巴母细胞瘤细胞;HLCL9C3 | 磷酸化粘着斑激酶封闭多肽 |
| 人类淋巴母细胞瘤细胞;HLCL21B8 | 2号染色体开放阅读框6封闭多肽 |
| 小鼠杂交瘤细胞;HB(Balb/cXNS1)FA6IIG5 | 蝮蛇蛇毒蛋白封闭多肽 |
| 小鼠杂交瘤细胞;HB(Balb/cXNS1/1)JT1-1F3-E5 | KHSRP蛋白封闭多肽 |
| 小鼠杂交瘤细胞;HB(Balb/cXNS1/1)JT1-1F3 | 兔小肠平滑肌细胞SALFf蛋白封闭多肽 |
| 小鼠杂交瘤细胞;HB(Balb/cXNS1/1)JT4C3 | 核有丝分裂器NuMA蛋白封闭多肽 |
| 小鼠杂交瘤细胞;HB(Balb/cXNS1/1)12 | 泛素样蛋白SUMO2激活酶封闭多肽 |
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验一、摘要 目的:建立兔膀胱平滑肌细胞的分离、培养和鉴定的方法。方法:成年新西兰白兔两只(正常及梗阻各一只),采用酶法分离技术获得膀胱平滑肌细胞后于10%小牛血清的DMEM中培养,观察细胞形态和扩增情况,用爬片染色、电镜、蛋白质α-肌动蛋白(α-actin)鉴定细胞类型。结果:倒置显微镜下观察均呈“谷和峰”样结构、细胞爬片HE染色及电镜检查均证实为平滑肌细胞。免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应。从细胞爬片HE染色和免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应中我们发现该方法所的膀胱平滑肌细胞
实验材料: 1. 正常大兔主动脉 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2 3. 消化液:0.125%胰蛋白酶,0.1%胶原酶Ⅰ 4. 细胞培养瓶(T25) 5. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊 6. 网筛(100目) 7. 离心管(15ml、50ml) 实验方法: 1. 处死大兔,分离出主动脉,放入预冷的含双抗的1×PBS(pH=7.2)反复清洗3次。以洗去
胃幽门与十二指肠交界处。在十二指肠起始端扎一线,剪取十二指肠、空肠,放入冷台氏液内。先用20m1注射器冲洗肠内容物,冲洗干净后剪成若干约1.5cm长的小肠段(每一实验小组一段)。在其两端结扎,一端做一短线环固定在通气的L管下方或浴皿内,另一端扎线与张力传感器相连。将肠段完全浸浴在调好温度的麦氏浴槽中,并调整好台氏液充气量(小气泡接连不断)。 游离及取出肠段时,动作要快,取兔肠及兔肠穿线时,尽可能不用金属及手指触及。为保持离体肠段的活性,可先预冷充氧的营养液,游离肠段及穿线在预冷的营养液中
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









