大鼠原代结膜成纤维细胞

细胞简介：

结膜松弛症  (conjunctivochalasis ，CCh)  是由于球结膜过度松弛和  (或)  下睑 缘张力高 ，造成松弛球结膜堆积在眼球与下睑缘、  内外眦部之间 ，形成皱褶 ，  引 起眼表泪液分布异常 ，并伴有眼部不适如流泪、干涩、异物感等症状的眼病。有 研究表明结膜松弛症中结膜成纤维细胞的改变 ，影响细胞外基质成分的平衡状态 和稳定性 ，可能是结膜松弛症发生的原因。

基本信息：
细胞名称：大鼠原代结膜成纤维细胞
组织来源：结肠组织
商品货号：YS-01X8063
种属来源：大鼠
产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶
包被条件：
培养基：原代成纤维细胞培养体系
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：长梭形细胞
传代特性：根据细胞特性
传代比例：
消化液：0.25%胰蛋白酶
培养条件：气相：空气 ，95%；  CO2 ，  5%




原代细胞试用的实验类型：

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究，如蛋白质组学、基因组学、细胞株（系）研究、DNA，RNA和遗传学研究等，还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验，如下：
一、细胞增殖检测：
常见检测方法：CCK8检测法 ，MTT检测法，Brdu检测法，Edu检测法，平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法：流式检测细胞周期，标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法：流式检测细胞凋亡，线粒体膜电位，活性氧检测，Hoechst染色，电镜，TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法：细胞划痕实验，Transwell实验，Invasion实验


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人乳腺癌细胞；MCF7B	蛋白激酶C封闭多肽
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人脑瘤细胞；SF763	血清应答因子封闭多肽
小鼠血细胞；WEHI-3[WEHI3]	紫外切除修复蛋白RAD23A封闭多肽

原代细胞培养方法及注意事项：


1.准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。
3.处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切：用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块，以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤
掉尚未充分消化开的组织块。低速（500~1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。
7.计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2~7.4范围，培养液呈微红色，如颜色
偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。
8.培养：置于36.5℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶盖需拧松半圈。