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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 库存:
48
- 生长状态:
贴壁
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
长梭形,不规则细胞
- 物种来源:
人
- 组织来源:
扁桃体组织
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
| 细胞名称 | 人扁桃体静脉平滑肌细胞 | 组织来源 | 扁桃体组织 |
| 商品货号 | YS-01X7927 | 种属来源 | 人 |
| 包被条件 | 换液频率 | 每2-3天换液一次 | |
| 生长特性 | 贴壁培养 | 细胞形态 | 长梭形,不规则细胞 |
| 传代特性 | 细胞特性确定传代 | 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养基 | 原代平滑肌细胞培养体系 | 培养条件 | 气相: 空气,95%;CO2 ,5% |
| 细胞简介 |
| 扁桃体是一对扁卵圆形的淋巴器官, 位于扁桃体窝内。按其位置分别称为腭扁桃 体、咽扁桃体和舌扁桃体。其中,腭扁桃体大, 通常所说的扁桃体即为腭扁桃 体。静脉的管壁较薄,弹性小, 管腔大, 管内血流速度较慢。血管疾病发生和发 展的一个主要因素使由于血管平滑肌细胞转变成为了具有繁殖能力的表型。 |
质量检测:实验室分离的人扁桃体静脉平滑肌细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
人扁桃体静脉平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,人扁桃体静脉平滑肌细胞以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
人扁桃体静脉平滑肌细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈长梭形,不规则细胞 ,在技术部标准操作流程下,细胞可传2-3代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,
37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度
的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内
加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验
器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL
(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
原代细胞培养方法及注意事项:
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。
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文献和实验的大血管。 二、咽的分部(图6-27、28) 根据咽腔向前方的通道,可分为上、中、下三部,即鼻咽部、口咽部及喉咽部。 1.鼻咽部nasal part of pharynx 上起颅底,下至软腭平面,是鼻腔后部的直接延续,向前经鼻后孔通向鼻腔,咽顶呈拱状,称咽穹。后部粘膜内有丰富的淋巴组织,称咽扁桃体,在婴幼儿较发达,10岁后完全退化,有时婴儿可出现异常增大,叫增殖腺。 约在下鼻甲后方1厘米处,咽侧壁上有咽鼓管咽口,经咽鼓管通向中耳鼓室。在咽鼓管口的前
,纵行肌收缩可使咽上提,协助吞咽和封闭喉口。 四、咽的血管、神经和淋巴 分布到咽动脉主要是直接或间接发自颈外动脉的小支:咽升动脉、腭升动脉、腭降动脉的分支及翼管动脉。咽的静脉主要在咽外膜内形成咽静脉丛,一部分汇入翼丛,一部分汇入椎静脉丛,其余各支合成咽静脉注入颈内静脉或其属支甲状腺上静脉和舌静脉。咽的淋巴主要注入咽后淋巴结和颈深淋巴结。咽的神经来自舌咽神经、迷走神经的咽支及交感干的颈上神经节咽支,在咽外壁内形成咽丛。 图34-3 腭扁桃体冠状
和少量巨噬细胞与郎格汉斯细胞,称为上皮浸润部(图9-24)。上皮内还有一些毛细血管后微静脉,是淋巴细胞进出上皮的主要通道。上皮细胞之间还有许多隧道样细胞间通道,浅表的部分通道直接开口于表面,有的通道开口处覆有一个扁平的微皱褶细胞(microfold cell,M cell)。上皮间隙内以T细胞多,这些经常迁移和更换。上皮内的浆细胞常分布在有孔毛细血管附近,有利于分泌的抗体进入血流。 图9-23 腭扁桃体 图9-24 腭扁桃体上皮浸润部 小儿的腭扁桃体较发达
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