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文献和实验细胞凋亡事件发生时,会出现蛋白质和核酸分子结构的改变,形成新的表位。利用免疫学方法对这些表位进行鉴定,有助于判断样本中细胞凋亡事件的发生。 细胞凋亡的发生,是由于内源性核酸内切酶的激活,这种钙和镁依赖性核酸酶容易进入的核小体间区解开双链DNA,产生单/低聚核小体片段,而核小体本身由于DNA与组蛋白H1、H2A、H2B、H3和H4形成紧密复合物而不被核酸内切酶裂解。采用双抗体夹心酶免疫法,应用小鼠抗DNA和抗组蛋白的单克隆抗体,与核小体片段形成夹心结构,可特异性检测细胞溶解物中的单
相关专题 细胞凋亡 发生时,内源性核酸内切酶将分解核小体区间的双链DNA,但核小体本身由于由组蛋白紧密结合而免受切割,单克隆抗体可以与核小体形成夹心结构,可通过检测核小体判断细胞是否经历凋亡事件。 (一) 原理 细胞凋亡的发生,是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp~200bp或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H2A、H2B、H3和H4形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用
(一) 原理 细胞凋亡的发生,是由于钙- 镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA , 产生180bp ~200bp 或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H2A 、H2B 、H3 和H4 形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用双抗体夹心酶免疫法,应用小鼠抗DNA 和抗组蛋白的单克隆抗体,与核小体片段形成夹心结构,可特异性检测细胞溶解物中的核小体片段。 (二)材料与试剂 1 .采用Boehringer
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