流式细胞管, 14ml 圆底试管/摇菌管

流式细胞术实验流程

细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS)重悬细胞，用流式细胞仪进行检测和分析。 注意事项 在抗体使用之前，快速离心一下，使之聚集到管的底部。 荧光标记的抗体应该避光4℃保存，不要冷冻。 当染色的时候，固定或延迟分析可能降低某些抗体的荧光信号。为了得到更好的结果，染色后应该马上分析。 二、细胞内细胞因子染色步骤 细胞准备 1.1 收集细胞。经刺激和阻断处理的细胞（具体处理方案请参考文献进行），加细胞染色buffer（或含1%BSA的PBS）制成单细胞悬液，调整细胞浓度约为1 × 107/mL

流式细胞表面染色步骤

一、样本准备 详见流式细胞术样本制备技术、流式实验样本制备方法及注意事项 收集细胞，200 目筛网过滤，收集滤液，300 g 离心 5 min，弃上清 向细胞中加入适量细胞染色 buffer（或含 1%BSA 的 PBS），用移液枪轻轻吹打细胞重悬 二、细胞计数 用血球计数板或其他仪器对悬液进行计数后，调整细胞浓度约为 1 × 107/mL 三、设置实验分组 四、封闭 Fc 受体 封闭 Fc 受体能减少染色过程中的非特异性染色。 小鼠中，纯化的 CD16/CD32 单抗能和 Fc

FACSAria流式细胞仪无菌分选的基本流程

和液流的形态是否正常。如果出现异常，可以通过调整喷嘴的位置，改变Breakoff 窗口的Amplitude的大小和打开Attenuation开关等来进行调整。（具体操作可参考Instrument User’s Guide的194－200页），直至液流形态和位置符合分选要求。 3、在上样管中装入1 ml 活性氯浓度为0.5% 的次氯酸钠溶液,将上样管放在上样架上，点击Acquisition窗口的Load开关，运行15－20分钟后，点击Unload开关，取下上样管。 4、将Sheath液换为无菌PBS